為了探討MDM2對病理應(yīng)激反應(yīng)中T細胞的影響，研究人員用ID8卵巢癌細胞腹腔接種MDM2+/+Cd4-Cre和Mdm2fl/flCd4-Cre小鼠。研究發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)Mdm2fl/flCd4-Cre小鼠在控制ID8腫瘤進展方面的效率低于Mdm2+/+Cd4-Cre小鼠。與Mdm2+/+Cd4 Cre小鼠相比，Mdm2fl/flCd4 Cre小鼠伴有大量腫瘤浸潤性CD8+T細胞凋亡，，而CD8+T細胞腫瘤浸潤較少。與Mdm2+/+CD8+T細胞相比，腫瘤浸潤的Mdm2–/–CD8+T細胞表達低水平的抗凋亡蛋白（Bcl2和Bcl-xL）和高水平的促凋亡蛋白（Bak、裂解的caspase 8（cl-caspase 8）和cl-caspase 3）。

 

 

 

 

接下來，研究人員將這些觀察擴展到不同的腫瘤類型。通過使用MC38結(jié)腸癌細胞皮下接種Mdm2+/+Cd4-Cre和Mdm2fl/flCd4-Cre小鼠。同樣，與野生型小鼠相比，T細胞中MDM2的丟失導(dǎo)致腫瘤生長增強，如腫瘤大小和重量所示。與此結(jié)果一致，腫瘤浸潤性CD8+T細胞凋亡水平較高，腫瘤浸潤性CD8+T細胞百分比較低，Ki-67+CD8+T細胞），顆粒酶B+CD8+T細胞和干擾素-γ（IFN-γ）+CD8+T細胞） Mdm2fl/flCd4-Cre小鼠與Mdm2+/+Cd4-Cre小鼠比較。結(jié)果表明，MDM2正調(diào)控CD8+T細胞的存活和腫瘤的功能潛能。

 

 

 

為了測試MDM2和c-Cbl之間的相互作用是否以及如何改變c-Cbl介導(dǎo)STAT5降解的能力，研究人員深入探討了MDM2是否調(diào)控c-Cbl蛋白的表達。敲除Mdm2可降低Jurkat T細胞和LS 174T細胞中STAT5的表達，對c-Cbl蛋白沒有影響。此外，小鼠Mdm2+/+和Mdm2–/–T細胞的c-Cbl蛋白水平相當(dāng)。因此，MDM2不調(diào)控c-Cbl蛋白的表達。

 

 

 

研究人員進一步探索了MDM2是否抑制STAT5和c-Cbl之間的相互作用。通過使用不同量的Myc–MDM2以及HA–c-Cbl和DDK–STAT5轉(zhuǎn)染293T細胞。當(dāng)c-Cbl免疫沉淀后，隨著MDM2水平的增加，檢測到c-Cbl免疫沉淀復(fù)合物中STAT5的劑量依賴性減少。這些結(jié)果表明，MDM2增加導(dǎo)致STAT5與c-Cbl結(jié)合減少，從而減少c-Cbl介導(dǎo)的STAT5降解。

 

 

 

 

最后，研究人員在有或沒有MDM2的293T細胞中，HA–c-Cbl和DDK–STAT5以及His–泛素（His–Ub或His–Ub K48R）過表達。結(jié)果顯示STAT5泛素化主要通過K48發(fā)生，而強制表達MDM2抑制了K48。此外，敲低c-Cbl導(dǎo)致STAT5水平升高，這不能被LS 174T細胞中異位MDM2表達所修飾。因此，MDM2拮抗c-Cbl和STAT5之間的相互作用，阻止c-Cbl介導(dǎo)的STAT5降解并穩(wěn)定STAT5的表達。

 

 

綜上所述，該研究團隊提出了MDM2調(diào)節(jié)T細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子5（STAT5）穩(wěn)定性、T細胞存活和抗腫瘤免疫的生化、遺傳和功能證據(jù)。此外，在藥理學(xué)上靶向p53-MDM2相互作用可協(xié)同癌癥免疫治療。這些重要的見解將為MDM2靶向藥物的新設(shè)計、篩選和選擇以及未來臨床試驗的患者分層提供參考。