九九热免费在线观看_毛片女人毛片一级毛片毛片_欧美在线视频一区二区_在线免费看av片_精品视频9999_99视频网站

上海士鋒生物科技有限公司
免費會員

醋酸纖維素薄膜電泳操作要點及常見差錯和失敗原因分析

時間:2015/6/9閱讀:595
分享:

醋酸纖維素是提纖維素的羥基乙酰化形成的纖維素醋酸酯。由該物質(zhì)制成的薄膜稱為醋酸纖維素薄膜。 種薄膜對蛋白質(zhì)樣品吸附性小,幾乎能*消除紙電泳中出現(xiàn)的“拖尾"現(xiàn)象,又因為膜的親水性比較小,它所容納的緩沖液也少,電泳時電流的大部分由樣品傳導(dǎo),所以分離速度快,電泳時間短,樣品用量少,5 μg 的蛋白質(zhì)可得到滿意的分離效果。因此特別適合于病理情況下微量異常蛋白的檢測。


醋酸纖維素薄膜與濾紙相比較,有以下優(yōu)點:

(1)分離效果好。對蛋白質(zhì)樣品吸附極少,無“拖尾"現(xiàn)象,染色后背景能*脫色,各種蛋白質(zhì)染色帶分離清晰,因而提高了定量測定的性。

(2)快速省時。由于親水性較濾紙小,電滲作用小,電泳時大部分電流是由樣品傳導(dǎo)的,所以分離速度快,電泳時間短,一般電泳45~60分鐘即可,加上染色、脫色,整個電泳完成僅需90分鐘左右。

(3)靈敏度高,樣品用量少,血清蛋白電泳僅需2 μl 血清,故常用于檢測在病理情況下微量異常蛋白質(zhì)的改變。

(4)應(yīng)用面廣。某些蛋白質(zhì)在紙上電泳不易分離,如胎兒甲種球蛋白、溶菌酶、胰島素、組蛋白等用醋酸纖維素薄膜電泳能較好地分離。

(5)易保存,易定量。醋酸纖維素薄膜電泳染色后,經(jīng)冰乙酸、乙醇混合液或其他溶液浸泡后可制成透明的干板,有利于掃描定量及長期保存。


醋酸纖維素膜經(jīng)過冰醋酸乙醇溶液或其它透明液處理后可使膜透明化有利于對電泳圖譜的光吸收掃描測定和膜的長期保存。

1.  材料與試劑醋酸纖維素膜一般使用市售商品,常用的電泳緩沖液為pH8.6的巴比妥緩沖液,濃度在0.05~0.09 mol/L。

2.  操作要點

(1)膜的預(yù)處理:必須于電泳前將膜片浸泡于緩沖液,浸透后,取出膜片并用濾紙吸去多余的緩沖液,不可吸得過干。并在一角做上記號。

(2)加樣:樣品用量依樣品濃度、本身性質(zhì)、染色方法及檢測方法等因素決定。對血清蛋白質(zhì)的常規(guī)電泳分析,每cm加樣線不超過1 μl,相當(dāng)于60~80 μg的蛋白質(zhì)。

(3)電泳:可在室溫下進行。電壓為25 V/cm,電流為0.4~0.6 mA/cm寬。

(4)染色:一般蛋白質(zhì)染色常使用氨基黑和麗春紅,糖蛋白用甲苯胺藍或過碘酸-Schiff試劑,脂蛋白則用蘇丹黑或品紅亞硫酸染色。

(5)脫色與透明:對水溶性染料zui普遍應(yīng)用的脫色劑是5%醋酸水溶液。為了長期保存或進行光吸收掃描測定,可浸入冰醋酸:無水乙醇=30:70(V/V)的透明液中。

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 精品国产乱码久久久久久久软件 | 高h视频在线免费观看 | 日韩欧美国产成人一区二区 | 999热这里只有精品 久草网视频在线观看 | 亚洲欧美日韩国产成人精品影院 | 日韩一区二区三区在线观看 | 91com视频| 国产91综合 | 绯色一区二区三区不卡少妇 | 狠狠操夜夜操 | jojo的奇妙冒险星尘斗士埃及篇免费观看 | 99爱免费观看国语 | 91国产在线视频在线 | 免费一级a毛片在线 | 日本一级毛片在线播放 | 免费拍拍拍网站 | 国产精品成人av性教育 | 亚洲黄一区二区三区 | 国产第一页福利 | 亚洲女色av| 波多野结衣先锋在线 | 亚洲国产午夜精品 | 秋霞午夜日韩免费毛片 | 国产日韩欧美一区二区在线播放 | 国产良家自拍 | 天天躁日日躁狠狠躁2018 | 男人的网站在线观看 | 亚洲特级黄色片 | 精品国产一区二区三区四 | 久久久久久亚洲国产 | 91周晓琳系列在线观看第10部 | 从大树开始的进化动漫免费观看 | 免费无码AV片在线观看软件 | 欧美破处在线视频 | 好姑娘5剧情在线观看免费 国产成人精品无码免费看在线 | 狠狠穞www老司机的福利 | 国产精品乱战久久久 | 好吊妞视频788gao在线观看 | 亚洲一级片大全 | 欧美日韩一区国产 | 热久久精品免费视频 |