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上海士鋒生物科技有限公司
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血漿游離血紅蛋白測定

時間:2015/6/3閱讀:629
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實驗原理

 

血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態氧,使鄰甲聯苯胺氧化發生顏色變化,由無色zui終變為藍紫色。根據顯色深淺與標準進行比較,可測出其含量。

 

實驗方法

 

材料:

 

1.2g/L鄰甲聯苯胺溶液

 

2.1%H2O2

 

3.10%醋酸溶液

 

4.分光光度計

 

方法:

 

1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。

 

2.按下表進行操作,用分光光度計,波長為530nm,以空白管調零,測定測定管的吸光度。

試劑 (ml)

測定管

空白管

2 g/L鄰甲聯苯胺溶液

0.5

0.5

患者血漿

0.02

/

1% H2O2

0.5

0.5

混勻后室溫放置10min

10%醋酸溶液

5.0

5.0

室溫放置10min


3.計算公式

 

血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標準管吸光度×100

 

實驗結果計算

 

參考范圍:0-40mg/L

 

注意事項

 

1.一切容器避免血紅蛋白污染;

 

2.采血要順利,器皿要干燥,檢測血漿要新鮮,及時分離,防止人為溶血;

 

3.鄰聯苯胺溶液具致癌性,檢測時要小心,廢液要妥善處理,以免污染;

 

4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準確。

 

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