在對蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留的檢測過程中,要消除或控制影響分析結(jié)果的各種誤差,以保證測量結(jié)果的準(zhǔn)確性、溯源性。

1　實驗前準(zhǔn)備

溶劑、試劑和吸附劑的純度及適用性,不僅直接影響測定結(jié)果而且對氣相色譜儀中的色譜柱、檢測器也有一定的影響,因此在實驗前必須測試每批次空白試劑、吸附劑和試劑的可用性。對溶劑而言一般每批溶劑取100～200mL濃縮,定容lmL,進(jìn)樣1μL無干擾峰即可。而且在分析測定時,為避免交叉污染,要做全程序空白實驗,確保測定結(jié)果的準(zhǔn)確性、重現(xiàn)性。按比例配制的混合溶劑,由于各溶劑的沸點不同,放置時的揮發(fā)程度不同,比例易改變,因此混合溶劑宜現(xiàn)用現(xiàn)配。

2　標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是固體的,稱量時要快、準(zhǔn),溶解并定容,定容所用溶劑與樣品預(yù)處理所用溶劑相同。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是液體的,按要求配制。同時配制標(biāo)準(zhǔn)工作系列,并在氣相色譜儀上測定其標(biāo)準(zhǔn)工作系列并繪制校準(zhǔn)曲線。由于低濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液穩(wěn)定性差,易揮發(fā),導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度降低,因此,在測樣時先作單點或多點校正,以確定其濃度及變化的程度,以便及時重新配制標(biāo)準(zhǔn)溶液,從而確保測定結(jié)果的準(zhǔn)確性,再現(xiàn)性。在配制混合標(biāo)準(zhǔn)溶液時要依據(jù)各農(nóng)藥組分響應(yīng)值的大小,取不同的量來配制,使各組分響應(yīng)值大致持平。

3　樣品制備

3. 1　樣品預(yù)處理

取樣必須要有代表性,采用科學(xué)的抽樣方法以確定檢測數(shù)據(jù)的科學(xué)性和準(zhǔn)確性。對于蔬菜、水果而言,需把不要的部位去掉,采用四分法縮分,并切碎、打漿,稱量。而且在每次切碎、打漿前都必須洗凈所用的工具,避免樣品之間的污染。

3. 2　樣品前處理

 樣品前處理的基本要求就是減少待測農(nóng)藥的損失,提高回收率;排除雜質(zhì)的干擾;保持各操作的一致性。

3. 2. 1　提取　提取過程很重要,提取的與否直接影響測定結(jié)果,在分析過程中雖不能控制提取效率,但在分析過程中應(yīng)盡可能保持確證的提取程序不變。提取劑的選擇根據(jù)相似相溶的原理,盡量選用對待測農(nóng)藥溶解度大的溶劑并盡量減少雜質(zhì)的提取,提取劑可用單劑或混合溶劑。提取方法可采用浸泡過夜、振蕩提取、超聲波提取、索氏提取等,一般采用浸泡過夜和振蕩提取相接合的方法來提取。

3. 2. 2　凈化　將提取液凈化,凈化方式有液液分配、柱層析等,其目的都是去除雜質(zhì),減少干擾。在液液分配方式凈化中,開始萃取時,要多次排氣,特別是低沸點溶劑,如二氯甲烷等;分層較好時, 注意分液漏斗壁上的水氣泡,當(dāng)有乳化現(xiàn)象不易分層時,應(yīng)長時間靜置、機械攪動、加電介質(zhì)或離心。萃取次數(shù)要根據(jù)每次的萃取效率來定。用柱層析方式凈化時,一般采用濕法裝柱比較好控制,在淋洗時要做淋洗曲線,同時要注意淋洗速度,不要太快,否則收率低,分離不好。裝柱時要注意每一層一定要敲實,而且各層之間界面要平整、清晰,在預(yù)淋洗、上樣、冼脫時柱中液面降至柱填充劑表面時再進(jìn)行下一步操作,以保證淋洗效果。

3. 3. 3　濃縮定容　經(jīng)凈化后的樣液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮后轉(zhuǎn)移、定容。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)時是減壓蒸餾,密閉性高,蒸發(fā)速度快,但注意流速不能快, 不要蒸干, 在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)時溫度要小于40℃。

4　樣品分析

將制備好的樣品上機測定。

 1)在樣品測定前必須進(jìn)行單點或多點校正,以確定標(biāo)準(zhǔn)溶液的有效性。

 2)每批樣品檢測都要進(jìn)行混合標(biāo)樣的測試,空白樣及添加空白樣的測試,同時每一測試農(nóng)藥的色譜參數(shù)(如分離度、拖尾因子、相對響應(yīng)值等)應(yīng)符合方法性能要求,相對保留時間的變幅應(yīng)在2%以內(nèi)。介質(zhì)的干擾峰不應(yīng)大于等于0. 3LCL (*校正水平,即與規(guī)定的*殘留比較,檢測方法應(yīng)該達(dá)到的*檢測濃度) ,若存在介質(zhì)效應(yīng),則需要使用添加介質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液。在測定時,可用標(biāo)準(zhǔn)和樣品交替進(jìn)樣的辦法來減少誤差。

 3)準(zhǔn)確度和精密度。每批至少做兩個添加濃度的回收,當(dāng)符合要求后檢測數(shù)據(jù)方可報出,否則必須查找原因重新檢測。

5　數(shù)據(jù)處理

5. 1　標(biāo)準(zhǔn)溶液的定量計算及其濃度的有效數(shù)字

標(biāo)準(zhǔn)溶液的定量計算是在整個測定過程中響應(yīng)值變化不大時,采用前、中、后測定值取平均值,即全過程平均。標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的有效數(shù)字由其純度、取樣量和量器決定。

5. 2　測定數(shù)據(jù)的計算

首先對所測定的結(jié)果進(jìn)行定性分析,判斷、確認(rèn)后,再選擇合適的積分條件,進(jìn)行積分,并定量計算。

5. 3　報告結(jié)果的有效數(shù)字

報告結(jié)果的有效數(shù)字要依據(jù)取樣量、標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度和儀器的精度等多個值的有效數(shù)字的位數(shù)來決定,報告結(jié)果時,測定結(jié)果的誤差只取一位,測定結(jié)果有效數(shù)字的*后一位即為誤差的對應(yīng)位。

原創(chuàng)作者：北京普瑞分析儀器有限公司