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閱讀:236發布時間:2014-4-24
細胞培養對無血清培養基的適應
有兩種方法可以使細胞適應無血清培養基(SFM):
1.直接適應法式—將細胞直接從添加血清的培養基轉換到無血
清培養基中。
2.連續適應或循序隔絕法—分幾步將細胞從添加血清的培養基
轉換到無血清培養基中。與直接適應法相比較,連續適應法對于
細胞更溫和些。
為了使細胞適應無血清培養基,關鍵是細胞培養應滿足以下條
件:
1.處于對數生長中期
2.存活率大于90%
3.在適應期間,以較高的初始細胞接種量進行接種
下面列出了常規適應步驟。初始細胞接種量、細胞產量和培養
周期是連續優化的良好開端。
直接適應
有些類型的細胞可以直接從含有血清培養基適應無血清培養基。
對于直接適應,細胞接種量應在2.5 x 105 -3.5 x 105細胞/ml范圍
內,當細胞密度達到1 x 106-3 x 106細胞/ml時,傳代培養細胞。
培養4至7天后,當細胞密度達到2 x 106 -4 x 106細胞/ml時,細
胞已*適應了無血清培養基。當細胞密度達到1x 106 -3 x 106
細胞/ml且存活率為90%時,應當每隔3到5天再次將適應了無血
清培養基的貯存細胞在無血清培養基中進行傳代培養。
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