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小鼠骨保素（OPG）Elisa Kit

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更新時間：2019-02-19 16:57:47瀏覽次數(shù)：556次

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產(chǎn)品簡介

全程ELISA實驗技術(shù)指導(dǎo)，小鼠骨保素（OPG）Elisa Kit免費代做實驗（從標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗、實驗、數(shù)據(jù)分析等全實驗過程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。）

詳細(xì)介紹

上海撫生“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購小鼠骨保素（OPG）Elisa Kit優(yōu)勢如下：
1）*抗體——高效、靈敏、特異
2）規(guī)范包被操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3）*的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4）適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5）可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
小鼠骨保素（OPG）Elisa Kit Mouse OPG ELISA Kit
骨保素(OPG)是一種分泌型糖蛋白，屬于TNF受體超家族成員，具有TNF受體超家族特征性的N端富含半*區(qū)域，其分子結(jié)構(gòu)與TNFR-2及CD40尤其相似，但它不含跨膜疏水區(qū)，小鼠OPG與人、大鼠的同源性分別為85%和95%，提示OPG基因在進(jìn)化中的高度保守。OPG分子由401個氨基酸組成，N端21個氨基酸為信號肽，經(jīng)糖基化后，成熟的OPG分子包含380個氨基酸，在胞內(nèi)先形成55 ku的單體，隨后兩條肽鏈間的Cys400形成二硫鍵，以110 ku的同源二聚體形式分泌至胞外，每條OPG多肽鏈包含23個半*，可形成9對二硫鍵，整個蛋白質(zhì)分為7個結(jié)構(gòu)域，并形成3個功能區(qū)：TNF受體結(jié)構(gòu)區(qū)，包括結(jié)構(gòu)域1～4，尤其是Cys185之前部分，是OPG主要的功能區(qū)域，執(zhí)行抑制破骨細(xì)胞的功能；死亡域同源區(qū)5和6，與Fas蛋白跨膜區(qū)形成融合蛋白后具有很強的細(xì)胞毒性，可以引起細(xì)胞凋亡；肝素結(jié)合結(jié)構(gòu)區(qū)，其作用尚不明確。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（ELISA）。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)*（biotin）標(biāo)記。樣品和*標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
小鼠骨保素（OPG）Elisa Kit操作流程示意：
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操作步驟：
1、小鼠骨保素（OPG）Elisa Kit標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，依次進(jìn)行稀釋數(shù)倍。
2、加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3、溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4、配液：將30倍（48T 的20 倍）濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6、加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7、溫育：操作同3。
8、洗滌：操作同5。
9.在確保酶標(biāo)板底無水滴及孔內(nèi)無氣泡后，立即用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測量各孔的光密度（O.D. 值）。
10、顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
11、終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
12、測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
試劑和樣本的控制方法：
一、小鼠骨保素（OPG）Elisa Kit試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，已獲得國家承認(rèn)的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、小鼠骨保素（OPG）Elisa Kit樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解
以下是小鼠骨保素（OPG）Elisa Kit的詳細(xì)介紹，點擊了解更多Mouse ELISA Kit。
*結(jié)合蛋白4(RBP4)檢測試劑盒　規(guī)格：　48T/96T