人（Human）缺血修飾性白蛋白（IMA）說明書
　　
　　本試劑盒僅供研究使用標本：血清或者血漿
　　
　　一、試劑組成
　　
　　精密度微孔板96孔（MicrotitrationStrips）1塊2～8℃干燥保存
　　
　　酶標偶合液（Conjugate）1瓶12.0毫升2～8℃冷藏保存
　　
　　標準品（Standard）5瓶各1.0毫升2～8℃冷藏保存
　　
　　呈色劑A（SubstrateA）1瓶6.0毫升2～8℃避光冷藏保存
　　
　　呈色劑B（SubstrateB）1瓶6.0毫升2～8℃避光冷藏保存
　　
　　終止液（StoppingSolution）1瓶6.0毫升室溫保存
　　
　　20倍濃縮洗滌液（RinsingBufferx20）1瓶60.0毫升2～8℃冷藏保存
　　
　　5倍濃縮樣品稀釋液（Diluentx5）1瓶15.0ml2～8℃冷藏保存
　　
　　英文說明書，中文說明書各一份室溫保存
　　
　　人（Human）缺血修飾性白蛋白（IMA）說明書

        二、注意事項
　　
　　1.此試劑為體外檢測試劑，效期內使用，試劑應視為傳染物，不同總批號的試劑不能混用。
　　
　　2．使用前應將盒內各試劑取出。室溫放置至少30分鐘，
　　
　　3．濃縮洗滌液出現結晶后，請于37℃孵育15分鐘。
　　
　　4．濃縮樣品稀釋液出現結晶后，請于37℃孵育15分鐘
　　
　　5．若24小時內進行實驗，標本可存放于2～8℃。不需及時實驗，標本-20℃保存，避免反復凍融。
　　
　　6．在反復清洗微孔板，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低度，造成吸光度偏離的假像。
　　
　　7．加樣完畢后，應注意輕微搖動微孔反應條，以便使孔中的液體充分混勻。
　　
　　8．試劑盒保存于2～8℃，請勿冷凍，有效期請見盒內標示。
　　
　　三、實驗前準備
　　
　　1．使用前應將盒內各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。
　　
　　2．準備各種實驗儀器及材料，如微量移液器，吸頭，醫用蒸餾水等
　　
　　3．濃縮洗液與醫用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應用洗滌液
　　
　　4．濃縮樣品稀釋液與醫用蒸餾水1︰4倍稀釋成應用樣品稀釋液
　　
　　5．用應用樣品稀釋液來稀釋樣品，按照1：100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應用樣品稀釋液中，充分混勻待用。）
　　
　　人（Human）缺血修飾性白蛋白（IMA）說明書

        四、操作步驟
　　
　　1．取出酶標板，設空白孔，依照次序對應分別加入100μl的標準品于空白微孔中（空白孔視為0號標準品，用醫用蒸餾水替代）
　　
　　2、分別標記樣品編號，加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中（不同的樣本采用不同的吸頭）。
　　
　　3、將酶標板置于37℃溫育30分鐘；
　　
　　4、將酶標板板取出，將其中的液體甩去，每個孔中全部加滿應用洗滌液后，立即甩去液體;
　　
　　5、每個孔中加滿應用洗滌液后，輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標板拍干。
　　
　　6、重復第5個步驟5次，在吸水紙上將酶標板拍干。
　　
　　7、在標準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標偶合溶液。
　　
　　8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。
　　
　　9、將酶標板取出，將其中的液體甩去，每個孔中全部加滿應用洗滌液后，立即甩去液體。
　　
　　10、每個孔中再次加滿洗滌應用液后，室溫輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標板拍干。
　　
　　11、重復第5個步驟5次，在吸水紙上將酶標板拍干。
　　
　　12、在每個孔中加入底物A50μl后立即加入底物B50μl。輕輕振蕩混勻。（A液、B液采用不同的吸頭加樣）
　　
　　13、將酶標板置于37℃避光溫育反應15分鐘。
　　
　　14、每個微孔中加入50μl的終止液，輕輕振蕩混勻。
　　
　　15、在酶標儀上，450nm處測定OD;顯色后，15分鐘內進行測定。
　　
　　16、根據制備的標準曲線，計算樣本含量
　　
　　五、結果判斷
　　
　　1.儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值；
　　
　　2、檢測值范圍：0–80ng/ml
　　
　　3、敏感度：0.5ng/ml
　　
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