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細胞名稱 雜交瘤細胞;S-66-5
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
細胞種類
凍存
對培養的細胞進行凍存的方法是將細胞置于含有(DMSO)等冷凍保護劑的*培養基中于液氮中儲存。冷凍保護劑可降低培養基的冰點,并可減緩冷卻速度嗎,大大降低冰晶形成的危險 (冰晶可損傷細胞,導致細胞死亡)。
注:DMSO 可促進有機分子進入組織。操作含DMSO的試劑時,應采用與此類物質安全危害相適應的設備和操作規范,并應按照當地法規處置此類試劑。
細胞凍存指導原則
凍存細胞系以備將來之用時,必須遵守以下原則。與其他細胞培養操作一樣,我們建議您嚴格遵守您所用細胞系附帶的操作說明,以便獲得結果。
1)在高細胞濃度情況下進行培養細胞的凍存,并且細胞傳代次數盡可能少。確保凍存前活細胞百分比至少為90%。請注意凍存條件取決于所用細胞系。
2)細胞應緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。
3)必須使用推薦的凍存培養基。凍存培養基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑
4)將冷凍的細胞于 -70°C 以下溫度儲存;溫度高于 -50°C 時,冷凍的細胞將開始變質。
5)必須使用無菌凍存管儲存冷凍的細胞。裝有冷凍細胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內保存
6)必須穿戴個人防護設備。
7)所有與細胞接觸的溶液和設備均應為無菌狀態。必須采用正確的無菌技術,并且在層流通風櫥內進行。
凍存培養基
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養基。凍存培養基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養基。
1)細胞凍存培養基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養基,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養細胞凍存方案
以下實驗方案介紹了培養細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養容器上脫離下來。用該細胞所需*培養基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度,計算凍存培養基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C?;蛘?,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
250克 Alkaline Peptone Water 3%氯化鈉堿性蛋白胨水 副溶血性弧菌的選擇性增菌培養
250克 Strain Store Medium 菌種保存培養基 常用細菌斜面傳代
250克 Blood Agar Base 血瓊脂基礎培養基 供分離營養要求較高的致病菌用
250克 L-G Medium Base,Modified 改良羅氏培養基基礎 結核桿菌的培養,計數保存,照光試驗,藥物敏感性測定及菌型鑒定
250克 MiddleBrook 7H10 Agar MiddleBrook 7H10瓊脂 分枝桿菌的分離培養
250克 MiddleBrook 7H11 Agar MiddleBrook 7H11瓊脂 分枝桿菌的分離培養
250克 Aeromonas Differential Agar 氣單胞菌鑒別瓊脂/Aeromonas Differential Agar 分離培養和鑒別氣單胞菌
250克 AFPA 曲霉菌鑒別瓊脂基礎 曲霉菌分離培養
250克 Blood Enrichment Medium 血液增菌培養基 用于血液中致病菌的增菌培養
250克 Bromcersol Purple Broth Base 糖發酵基礎肉湯 微生物檢驗中各種糖發酵實驗,無菌加入各種糖醇類物質
250克 Thioglycollate Medium 需氣菌厭氣菌培養基 用于培養需氧菌、微需氧菌和厭氧菌
250克 ASS Agar 抗菌素磺胺類敏感試驗瓊脂 用于磺胺類靈敏度試驗(WHO方法)
250克 AC Broth 通用培養肉湯 用于常見微生物增菌培養和不含防腐劑樣品的無菌試驗
250克 Egg-Yolk Salt Agar Base 卵黃高鹽瓊脂基礎 生物制品金黃色葡萄球菌選擇性分離
250克 Peptone From Casein Agar 酪胨瓊脂 生物制品無菌試驗
250克 腸道致病菌的選擇性分離、培養
250克 Alkaline Agar 堿性瓊脂平板 用于分離霍亂弧菌
250克 Alealine Bile Salt Agar AB瓊脂 分離霍亂弧菌
ml/瓶 用于 O157 菌快速檢測,O157 菌顯 紅色
5000ml/瓶
阪崎腸桿菌顯色培養基 1000ml/瓶 用于阪崎腸桿菌的分離,24h 內出 結果,阪崎腸桿菌顯藍綠色
尿道感染顯色培養基 1000ml/瓶 用于臨床樣本中引起尿道感染微 生物的檢測
mEI 瓊脂基礎 1000ml/瓶 用于水中腸球菌的檢測和計數, 24h 內出結果,腸球菌顯藍色。每100ml 培養基中需添加 1 支 20904
大腸桿菌/大腸菌群液體顯色培養基 1000ml/瓶 用于同時快速檢測大腸桿菌、大腸 菌群,24h 內出結果,大腸桿菌有 藍色熒光,大腸菌群呈藍色
改良 LMX 肉湯 2 萬 ml/瓶 用于同時快速檢測大腸桿菌、大腸 菌群,24h 內出結果
霉菌和酵母菌顯色培養基 1000ml/瓶
磷酸鹽緩沖液(pH7.2) 250g/瓶 用于樣品稀釋(GB、SN)
pH7.4 磷酸鹽緩沖液(PBS) 250g/瓶 用于樣品的稀釋、制備(中國藥典)
pH7.2 磷酸鹽緩沖液 250g/瓶 0.03mol/L ,用 于 樣 品制 備 和稀 釋(國家消毒技術規范)
無菌檢驗用洗脫液 250g/瓶 含 PBS,用于樣品的制備(國家消 毒技術規范)
胰蛋白胨生理鹽水溶液(TPS) 250g/瓶 用于樣 品稀 釋(國 家消 毒技 術規 范)
雜交瘤細胞;S-66-5氯化鈉胰蛋白胨稀釋液 250g/瓶 用于樣品的制備與稀釋(SN)
蛋白胨-鹽溶液 250g/瓶 用于樣品的稀釋(NY)
Amies 運送培養基 250g/瓶 用于致病菌標本的采集、運輸和保存
Cary-Blair 氏運送培養基 250g/瓶 用于致病菌標本的采集、運輸和保存
Stuart 運送培養基 250g/瓶 用于
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