PDI人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體ELISA試劑盒

BALP大鼠骨堿性磷酸酶酶聯(lián)免疫    TAFI兔纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物酶聯(lián)免疫
BALP人骨堿性磷酸酶酶聯(lián)免疫    TAFI人纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物酶聯(lián)免疫
BAX大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白酶聯(lián)免疫    TAFI人纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物酶聯(lián)免疫
BAX人Bcl-2相關(guān)X蛋白酶聯(lián)免疫     TAFI大鼠纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物酶聯(lián)免疫
PDI人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體ELISA試劑盒途：
用GsaR人促胃液素受體ELISA試劑盒的含量。

BAX兔Bcl-2相關(guān)X蛋白ELISA檢測(cè)     TAFI大鼠纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物酶聯(lián)免疫
BAX兔Bcl-2相關(guān)X蛋白ELISA檢測(cè)     TAb小鼠甲狀腺素抗體酶聯(lián)免疫
BAX豬Bcl-2相關(guān)X蛋白ELISA檢測(cè)     TAb小鼠甲狀腺素抗體酶聯(lián)免疫
BAX豬Bcl-2相關(guān)X蛋白ELISA檢測(cè)     TAb人甲狀腺素抗體酶聯(lián)免疫
BA人封閉抗體酶聯(lián)免疫    TAb人甲狀腺素抗體酶聯(lián)免疫
BB-Ab人抗BB抗體酶聯(lián)免疫     TAb人甲狀腺抗體酶聯(lián)免疫
BBGP-BB小鼠糖原磷酸化酶同工酶酶聯(lián)免疫    TAb人甲狀腺抗體酶聯(lián)免疫
BC027382人類似cDNA順序 酶聯(lián)免疫    TAb大鼠甲狀腺素抗體酶聯(lián)免疫

步驟一

雙抗體夾心法

1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過(guò)夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡(jiǎn)稱洗滌，下同）。

2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔）。

3.　加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。

4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。

然而，影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多，故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。