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小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)elisa檢測試劑盒?操作步驟

時間:2021/9/27閱讀:268
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小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)elisa檢測試劑盒操作步驟:


1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。

人胚肺成纖維細胞;IMR-90

人胚胎,皮膚,肌肉;M-7

人胚胎,皮膚,肌肉;M-20

人胚胎,皮膚,肌肉;M-22

人正常前列腺上皮細胞;RWPE-1

人羊膜細胞;WISH

人胚肺成纖維細胞;MRC-5

人胚胎肺成纖維細胞;WI-38

人胚腎細胞;293 [HEK-293]

人淋巴細胞;1301

人胚肺二倍體細胞;KMB-17

人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38]

人臍靜脈內皮細胞(人膀胱癌細胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]

人胚肺成纖維細胞;MRC-5

人羊膜細胞;WISH

人二倍體細胞;HEL

人正常肝細胞;L-02

人胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RA

人胚肺二倍體細胞;HL

人腎皮質近曲小管上皮細胞;HK-2

人臍靜脈內皮細胞;HUV-EC-C

人胚腎上皮細胞系;KiMA

人胚肺細胞系;KuMA

人永生化淋巴細胞;CNLMG-B5537LC

人類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN

人永生化淋巴細胞;CNLMG-B5538LC

人類成纖維細胞系;CNLMG-B5538SKIN

人肺轉化細胞;AE1201

人胚肺成纖維細胞;MRC-5

人胚肺二倍體細胞;HEL-1

人胚腎二倍體細胞;HEK-2

人胚肺二倍體細胞;KMB-17

人胚肺二倍體細胞;HEL-2

人胚胎皮膚成纖維細胞;HES

人皮膚成纖維細胞;HSAS4

人皮膚成纖維樣細胞;HSF2

人胚胎心臟成纖維樣細胞;HEH2

人支氣管上皮樣細胞;BEAS-2B

轉化細胞

SV40T轉化的人胚腎細胞;293T

雙位點HC-kit受體細胞株;DMF7

人干細胞因子單克隆抗體細胞株;AMS2(SCF3)

人APP-PS1雙基因轉染細胞株(HEK293);APP-PS1

Asp2人胚胎腎細胞轉化細胞;FC33

人胚腎細胞(亞系克隆);FIP293


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