九九热免费在线观看_毛片女人毛片一级毛片毛片_欧美在线视频一区二区_在线免费看av片_精品视频9999_99视频网站

研生elisa 銷售網點(上海研生實業有限公司)
中級會員 | 第15年

15201736385

ELISA試劑盒
elisa檢測試劑盒
細胞
蛋白
科研抗體
對照品/標準品
生物化學試劑產品
分子生物試劑盒
生物培養基
生物耗材
免疫組化試劑盒
BD耗材
擔體
新生胎牛血清
*原時間試劑
免疫組化代測服務
免疫組化服務
PCR試劑盒
ATCC細胞
質粒
分子生物學
原代細胞

質譜在糖蛋白研究中的應用

時間:2011/5/24閱讀:4056
分享:
  糖蛋白是蛋白質中的氨基酸側鏈被糖基化修飾后的蛋白質,廣泛存在于生物體中,具有特殊的生物學功能。研究糖蛋白的傳統方法一般是將糖鏈切掉并分離純化后再分別進行研究。采用基質輔助激光解吸/電離飛行時間質譜(MALDI-TOF-MS)——這一軟電離生物質譜技術,可直接測定糖蛋白的平均分子量及糖含量,應用蛋白酶切及內切糖苷酶酶切相結合的方法,可確定糖基化位點及糖苷鍵類型。
  
  一、糖蛋白平均分子量及糖含量的測定:
  
  在糖蛋白MALDI-TOF-MS質譜圖上表現為一簇峰,各峰之間約相差一個或幾個糖基,同時還出現多電荷峰,有些樣品中還含少量不帶糖鏈的蛋白峰。糖蛋白的分子量為這些多重峰的平均值。
  
  從不含糖鏈的蛋白的分子量可以直接得到糖含量,但因其豐度太小難以準確測定。采用內切糖苷酶F將糖鏈切除,得到含一個GlcNAc的肽鏈,肽鏈與糖蛋白平均分子量之間的差值即為糖鏈的分子量,糖鏈的分子量與糖蛋白平均分子量的比值即為糖含量。
  
  二、糖苷鍵類型及糖基化位點的測定:
  
  糖基化位點的確定,則必須依賴一系列酶切反應的實現來加以證實。一般步驟是:①先將糖蛋白還原烷基化、脫鹽,加Glu-c酶切,產物再用內切糖苷酶酶切,含糖肽段峰將出現位移。采用差位酶切法對其進行驗證:內切糖苷酶F(Endoglycosidase-F)切斷N-糖鏈中五糖核心區中,兩個N-已酰氨基葡萄糖間的內糖苷鍵,而糖N肽酶F(PNGase-F)切斷糖鏈與天冬酰氨間的糖肽鍵,兩者相差一個N-已酰氨基葡萄糖(194Da);②凝集素對糖肽的提取:凝集素是一類糖結合蛋白,能專一地識別某一特定結構的單糖或寡糖中特定的糖基序列并與之結合。核糖核酸酶B中的糖鏈為高甘露糖型,我們選用其特異性吸附凝集素----伴刀豆球蛋白(ConA)對含糖肽段進行提取,并直接進行MALDI-TOF-MS檢測,為今后糖肽序列分析及糖鏈結構分析奠定了基質譜在糖蛋白研究中的應用糖蛋白是蛋白質中的氨基酸側鏈被糖基化修飾后的蛋白質,廣泛存在于生物體中,具有特殊的生物學功能

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
撥打電話
在線留言
主站蜘蛛池模板: 你好星期六在线免费观看 | 欧美日韩黄视频 | 免费一级a毛片夜夜看 | 欧美一级视频免费看 | 日本在线一区二区三区 | 精品一级毛片 | 蜜桃一区二区三区在线 | 免费一级淫片日本高清视频一 | 日韩精品视频国产 | 黄色a级小视频 | 亚洲综合色网站 | 99久久免费观看 | 国产热RE99久久6国产精品首页 | 精品一区二区三区四区蜜桃 | 一人之下在线免费观看 | 国产偷久久久精品专区 | 777欧美精品 | 久久91亚洲精品 | 国产精品入口传媒小说 | 日韩 欧美 国产 一区 二区 | 99情趣网视频 | 日韩精品1区2区 | 国产精品久久久国产盗摄 | 在线播放中文一区 | 日本一级一片免费视频思欲 | 国产精品久久久久久久天堂 | 欧美女优一区 | 久久99久久99精品免视看婷婷 | 国产嫩草在线观看 | 久久蜜臀| 桃色视频在线播放 | 久久日本片精品aaaaa国产 | 日日激情 | 玖爱在线视频 | 91视频免费在观看 | 99精品久久精品一区二区爱城 | 亚洲免费资源 | 红杏亚洲影院一区二区三区 | 极色影院| 国产影片中文字幕 | 亚洲精品午夜不卡 |