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技術文章

體外哺乳動物細胞基因突變試驗儀

閱讀:56          發布時間:2025-5-6

體外哺乳動物細胞基因突變試驗儀

一、 儀器介紹

實驗目的:

本試驗用于檢測受試物對體外培養的哺乳動物細胞的基因突變作用,包括堿基對突變、移碼突變和缺失等,從而評價受試物引起突變的可能性

應用范圍

應用于科研、農業、衛生、教育、霧霾狀態可吸入顆粒染毒效果研究等各個領域

符合標準:

GB/T 15670.20-2017《農藥登記毒理學試驗方法第20部分:體外哺乳動物細胞基因突變試驗》

二、試驗流程

1)細胞培養:

選擇合適細胞系(如L5178Y、CHO),常規傳代培養

2)受試物處理:

暴露于不同濃度受試物(需設陰性/陽性對照)

3)表達期:

預留足夠時間(通常7-10天)使突變表型顯現。

4.)突變體篩選:

TK試驗:使用篩選TK突變體。

HPRT試驗:HPRT突變體。

5)克隆形成分析:

計數突變集落,計算突變頻率(突變集落數/存活細胞數)

6)數據統計:

與對照組比較,判斷突變率是否顯著增加。

三、注意事項

1)細胞活力控制:受試物濃度需保證細胞存活率(通常>50%

2)代謝活化系統:需加入S9混合物(模擬體內代謝,(如Aroclor 1254誘導的大鼠肝S9)。

3)假陽性/陰性:避免pH、滲透壓等非特異性因素干擾。

4)合規性:   遵循國際指南(如OECD 490ICH S2R1)。

 




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