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知識分享:免疫熒光雙標技術分析的誤區
首先是針對半定量分析在免疫熒光雙標技術分析中我們沒有檢測到一些含量,這些免疫熒光雙標技術只能通過設置參照指標,以參照指標的倍數來反映目標物相對含量,這個“相對"是針對參照的。分析結果是半定量的,也是沒有單位的。
免疫熒光雙標技術就是半定量分析嗎,其實在實驗中是不合適的,表面上看,這個過程與DAB染色后類似,但實際上其中存在相當多的變量,正是這些變量導致免疫熒光染色不適合做半定量分析。在理論上免疫熒光雙標技術,得到一張蛋白條帶所涉及的操作是相同的,后面對蛋白進行發光和拍照,這些也是在同一時刻進行的操作。不涉及時間差的問題。即你是在同一條件、同一時間對此條帶上的不同孔進行檢測。盡管也存在信號衰減的問題,但是此時所有孔代表蛋白的熒光衰減程度是一致的。
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