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??對(duì)于Elisa試劑盒的原理及相關(guān)檢測(cè)方法您了解多少?
??elisa試劑盒介紹
??ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。 ELISA試劑盒自從60-70年代問(wèn)世以來(lái),得到科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣,尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。 Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。
??elisa試劑盒原理
??酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(enzyme linked immunosorbent assay,簡(jiǎn)寫ELISA)指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到?>聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體特異性結(jié)合進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測(cè)方法。
??分類方法
??夾心法
??夾心法常用于檢測(cè)大分子抗原,一般的操作步驟為:
??將具有專一性的抗體固著(coating)于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體;
??加入待測(cè)檢體,檢體中若含有待測(cè)的抗原,則其會(huì)與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié);
??洗去多余待測(cè)檢體,加入另一種對(duì)抗原專一的一次抗體,與待測(cè)抗原進(jìn)行鍵結(jié);
??洗去多余未鍵結(jié)一次抗體,加入帶有酶的二次抗體,與一次抗體鍵結(jié);
??洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果。
??間接法
??間接法常用于檢測(cè)抗體,一般的操作步驟為:
??將已知的抗原固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余的抗原;
??加入待測(cè)檢體,檢體中若含有待測(cè)的一次抗體,則其會(huì)與塑膠孔盤上的抗原進(jìn)行專一性鍵結(jié);
??洗去多余待測(cè)檢體,加入帶有酶的二次抗體,與待測(cè)的一次抗體鍵結(jié);
??洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,加入酶底物使酶呈色,藉儀器(ELISA reader)測(cè)定塑膠盤中的吸光值(OD值),以評(píng)估有色終產(chǎn)物的含量即可測(cè)量待測(cè)抗體的含量。
??競(jìng)爭(zhēng)法
??競(jìng)爭(zhēng)法是一種較少用到的ELISA檢測(cè)機(jī)制,一般用于檢測(cè)小分子抗原,其操作步驟為:
??將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體;
??加入待測(cè)檢體,使檢體中的待測(cè)抗原與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié);
??加入帶有酶的抗原,此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié),由于塑膠孔盤上固著的抗體數(shù)量有限,因此當(dāng)檢體中抗原的量越多,則帶有酶的抗原可鍵結(jié)的固著抗體就越少,亦即,兩種抗原皆競(jìng)相與塑膠孔盤上抗體鍵結(jié),即所謂競(jìng)爭(zhēng)法之由來(lái);
??洗去檢體與帶有酶的抗原,加入酶底物使酶呈色,當(dāng)檢體中抗原量越多,代表塑膠孔盤內(nèi)留下之帶有酶的抗原越少,顯色也就越淺。
??ELISA試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品,勵(lì)志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司,產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個(gè)國(guó)家和地區(qū),我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營(yíng)宗旨;牢固樹(shù)立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向,不斷開(kāi)發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品,提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。
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