Elisa實驗——如何選擇試劑盒

　　ELISA產品選擇要素

　　根據實驗物種及待檢樣品性質來選擇

　　種屬：人、小鼠、大鼠、雞、牛、猴等;

　　樣本類型：血清、血漿、組織培養上清、組織或細胞裂解物。

　　根據樣品中檢測物水平選擇

　　寬動力學檢測范圍：對樣品種待測物水平沒有任何參考數據;

　　高靈敏度試劑盒：待檢物含量很低。

　　根據樣本可獲得性來選擇

　　通常商品化試劑盒的樣品用量在50μL或100μL，也有部分用量可以少至20μL。

　　供應商資質評估

　　同行口碑

　　文獻引用

　　品牌歷史

　　試劑盒關鍵技術參數

　　加標回收率

　　精密度

　　靈敏度等

　　回收率

　　將已知的低、中、高濃度的重組蛋白摻入到待測樣本中，摻入前后測到的濃度增加部分與摻入濃度之比就是回收率，以此驗證檢測的準確度。復雜的樣本基質，如血清、血漿中可能含有干擾因子，影響準確定量目標分析物。優秀的ELISA試劑盒回收率通常在80-120%之間(視為無可計量的基質干擾)，合格試劑盒在60%左右。

　　稀釋線性

　　樣本稀釋后，最終分析物濃度應該相同，這個就是的實驗線性。干擾因子會影響實驗的線性，除非在研發環節克服這些干擾效應。我們為每個驗證過的樣本類型用試劑自帶的稀釋液進行系列稀釋。結果用檢測值和理論值的百分比表示，線性介于80-120%為理想結果。

　　精密度

　　在相同條件下，對被測量物(高、中、低濃度)進行多次反復測量，測得值之間的一致(符合)程度。這一特性具有重要意義：

　　保證一項試驗中得到的結果是準確的，并且一次實驗到下一次實驗結果可重復;

　　判定兩個結果相同還是不同。

　　通常用變異系數(coefficient of variation, CV)來表示。優秀ELISA試劑盒的酶標板內變異系數(CV)小于5%，酶標板間變異系數小于8%。

　　校準

　　每個試劑盒包含的標準品都經過高純度蛋白的校準。聯科生物標準品質量是通過與母校準品進行比較而制定。用于保證不同批次間試劑盒的一致性，所有批次的試劑盒均經過母校準品校對，不會出現結果偏差。

　　特異性

　　抗體是特異的,只與相應抗原反應。實際制備的抗體卻常有非特異性反應，這是因為抗原不純造成的。多組分抗原之間存在共同的抗原決定簇，或者兩個抗原決定簇結構類似能與同一抗體結合，均可出現抗體與異源抗原的交叉反應。

　　ELISA試劑盒包含哪些組分

　　以雙抗夾心法中的二步法ELISA試劑盒為例，ELISA試劑盒一般包含說明書，封板膜，預包被的酶標板，標準品，生物s被標記的檢測抗體，鏈霉親和素標記的HRP,顯色液，終止液，檢測緩沖液，標準品稀釋液，洗液等十個組分。

　　ELISA試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。