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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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更新時間:2018-04-17 10:46:20瀏覽次數(shù):271次
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人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移系;PGBE1價格冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移系;PGBE1價格冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細(xì)胞名稱 人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移系;PGBE1價格
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 PGBE1由朱偉勇和鄭杰于1995年建系。源自人肺巨細(xì)胞癌系分離了多個單細(xì)胞克隆,經(jīng)體外侵襲實(shí)驗(yàn)和裸鼠體內(nèi)接種相結(jié)合進(jìn)行了初步鑒定后,挑選其中3個克隆化細(xì)胞亞系之一。該細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)的成瘤率均為100%,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率為94%。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C7
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供的報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
規(guī)格:96T/48T小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Insulin-like growth factor 2,IGF-2 ELISA Kit *
規(guī)格:96T/48T小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
規(guī)格:96T/48T小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP-2 ELISA Kit *
規(guī)格:96T/48T小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
規(guī)格:96T/48T小鼠胰島素原(PI)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Proinsulin,PI ELISA Kit*
規(guī)格:96T/48T小鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse insulin autoantibodies,IAA ELISA Kit進(jìn)口/原裝
Anti-KEAP1/FITC 熒光素標(biāo)記胞質(zhì)接頭蛋白Keap1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-ret IgG/Biotin *化羊抗大鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
抗Ⅵ型膠原抗體 Anti-Collagen Ⅵ 0.2ml
Mouse Anti-rabbit IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
FAM172A 英文名稱: FAM172A蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh pig cholerae salmonella 豬霍亂沙門氏菌抗體 規(guī)格 0.2ml
Goat Anti-ret IgG/Biotin *化羊抗大鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Testosterone 人睪酮Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Connexin-45 間隙連接蛋白45抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh NHE1/APNH1 鈉氫通道蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Human scavenger receptor B,SRB ELISA Kit 人清道夫受體B 96T
Transglutaminase 英文名稱: 谷酰胺轉(zhuǎn)胺酶1抗體 0.1ml
CHMP6 英文名稱: 染色質(zhì)修飾蛋白CHMP6抗體 0.1ml
Anti-Connexin-45 間隙連接蛋白45抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-SRC3/KAT13B/AIB1/FITC 熒光素標(biāo)記類固醇受體輔助活化因子-3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
FasL(抗原) Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
配對盒基因2抗體 Anti-PAX2 0.1ml
Sphingomyelin Synthase 2 英文名稱: 鞘磷脂合成酶2抗體 0.2ml
EXOSC10 英文名稱: 多發(fā)性肌炎/硬皮病自身抗原2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-NFATc2(Ser330) 磷酸化核因子活化T細(xì)胞胞漿蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml
FasL(抗原) Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Endostatin 內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
氫鉀ATP酶通道蛋白抗體 Anti-ATP4B/H+K+ ATPase 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-EGFR (Tyr992) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml
F10培養(yǎng)液(Ham) 250ml 國產(chǎn)
ZBT10 英文名稱: 鋅指蛋白ZBT10抗體 0.2ml
beta Defensin 1 英文名稱: 防御素β1/Defensin β1抗體 0.1ml
氫鉀ATP酶通道蛋白抗體 Anti-ATP4B/H+K+ ATPase 0.1ml
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