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胡金貴
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上海市楊浦區翔殷路128號
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豬副豬嗜血桿菌5型(HPS-5)樣本處理及要求

2021-4-22  閱讀(172)

豬副豬嗜血桿菌5型(HPS-5)樣本處理及要求

1.  血清將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或將上清置于-20-80保存,但應避免反復凍融。
2.  血漿EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20-80保存,但應避免反復凍融。
3.  組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將*碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mLPBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。

4.  細胞培養物上清或其它生物標本:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

注:標本溶血會影響最后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。



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