【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱:Vero(非洲綠猴腎細胞)操作步驟
細胞形態
上皮細胞樣
背景描述
Vero細胞是由日本千葉大學的Y·Yasumura和Y·Kawakita從正常成年非洲綠猴的腎臟建株的。1964年6月15日,B·Simizu將Vero細胞從千葉大學帶到國立健康研究所(NIH)國立過敏及傳染病研究所熱帶病毒實驗室時,已傳至第93代。
生長培養基
MEM(貨號:PM150410)+10% FBS(貨號:164210-500)+1% P/S(貨號:PB180120)
培養條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
操作步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等
2、*,專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株,免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片,三天回傳細胞生長狀態圖片,五天內有問題公司負責重發,超過五天時限至一個月內重發細胞收半價,超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠,完善、穩定的實驗體系,優秀的科研隊伍,*的實驗設備、準確可靠的實驗結果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
胰高血糖素受體抗體 Glucagon Receptor
生長分化因子3抗體 GDF3
磷酸化糖原合酶激酶3β抗體 phospho-GSK-3 Beta(Ser21)
G蛋白偶聯受體1抗體 GPR1
G蛋白β1抗體/*核苷酸結合蛋白β亞基1 G protein beta 1
G蛋白β3抗體/*核苷酸結合蛋白β亞基3 G protein beta 3
鳥苷酸還原酶2抗體 GMPR2
G蛋白偶聯受體γ12抗體 G gamma12
生長因子受體結合蛋白2相關接頭蛋白2抗體 GRAP2
G蛋白α亞單位蛋白Q抗體 GNAQ
生長抑制DNA損傷基因GADD45β抗體 GADD45B
細胞生長抑制蛋白22抗體(甲基化控制J蛋白) GIG22
G蛋白偶聯受體39抗體 GPR39
橋尾蛋白抗體 Gephyrin
半乳糖凝集素8抗體 Galectin 8
糖磷脂酰肌醇錨定蛋白137抗體 GPIP137
胰高血糖素樣肽2受體抗體 GLP2R
生長休止特定蛋白1抗體 Gas1
γ-谷氨酰轉移酶輕鏈1抗體 GGTL1
γ1氨基丁酸受體α5/GABRα5抗體 GABRA5
G蛋白激活內向鉀通道1抗體 GIRK1
G蛋白激活內向鉀通道3抗體 GIRK3
G蛋白偶聯受體48抗體 GPR48
糖基轉移酶GLT8D2抗體 GLT8D2
高爾基體外周膜蛋白p65抗體 GRASP65
細胞核因子GCNF/維甲酸受體相關受體抗體 GCNF
G蛋白轉錄因子α2/Gα t2抗體 GNAT2
脊髓性肌癥蛋白SMA抗體 Gemin 1
脊髓性肌癥蛋白SMA抗體 Gemin 2
脊髓性肌癥蛋白SMA抗體 Gemin 3
轉錄因子Gli2抗體 Gli2
轉錄因子Gli3抗體 Gli3
GLIS2蛋白抗體 GLIS2
鳥苷酸環化酶激活蛋白1抗體 Guanylin
Ai-Phospho-Smad2 (Ser465/467)/FITC 熒光素標記磷酸化細胞信號轉導分子SMAD2抗體IgG 植物葉綠體總蛋白定量檢測試劑盒 0.2ml
Ai-Phospho-Smad2 (Ser245/250/255)/FITC 熒光素標記磷酸化細胞信號轉導分子SMAD2抗體IgG 植物葉綠體外膜功能檢測試劑盒 0.2ml
Ai-Phospho-Smad3 (Ser423/425) /FITC 熒光素標記磷酸化細胞信號轉導分子SMAD3抗體IgG 植物葉綠體外膜脂質薄層色譜(TLC)分析檢測試劑盒 0.2ml
Ai-Smad4/FITC 熒光素標記Smad4抗體IgG 純化葉綠體DNA萃取試劑盒 0.2ml
Ai-Smad7/FITC 熒光素標記Smad 7抗體IgG 植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒 0.2ml
Ai-SMC1/FITC 熒光素標記染色體結構維持蛋白質1抗體IgG 高多糖多酚植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒 0.2ml
Ai-Phospho-SMC1 (Ser360) /FITC 熒光素標記磷酸化染色體結構維持蛋白質1抗體IgG 高多糖多酚植物組織葉綠體DNA高純分離試劑盒 0.2ml
Ai-Phospho-SMC1 (Ser957)/FITC 熒光素標記磷酸化染色體結構維持蛋白質1抗體IgG 植物細胞葉綠體DNA萃取試劑盒 0.2ml
Ai-SMN1/FITC 熒光素標記運動神經元生存蛋白1抗體IgG 大量植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒 0.2ml
Ai-Snail/FITC 熒光素標記抗Snail蛋白抗體IgG 植物乙醇酸氧化酶(glycolate oxidase)活性比色法定量檢測試劑盒 0.2ml
Ai-Snake poison Protein/FITC 熒光素標記抗蛇毒蛋白抗體(蝮蛇)IgG 植物核酮糖1,5二磷酸羧化/加氧酶(RUBPCase/Rubisco)羧化活性酶連續循環比色法定量檢測試劑盒 0.2ml
Ai-Snake poison Protein/FITC 熒光素標記抗蛇毒蛋白抗體(中華眼鏡蛇)IgG 植物核酮糖1,5二磷酸羧化/加氧酶(RUBPCase/Rubisco)加氧活性定量檢測試劑盒 0.2ml
Ai-SNAP-25 /FITC 熒光素標記突觸相關蛋白25抗體IgG 植物核酮糖1,5二磷酸羧化/加氧酶活化酶