【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱:A9(小鼠皮下結締組織細胞)操作步驟
細胞形態
成纖維細胞樣
背景描述
A9細胞是從野生型細胞株L中分離得到的。A9細胞對HAT選擇培養基敏感,并缺失了腺苷轉磷酸核糖基酶與次黃嘌呤轉磷酸核糖基酶;A9細胞對8-氮*(0.003mg/ml)和6-硫代*(0.1mM)有抗性。
生長培養基
DMEM高糖(貨號:PM150210)+10% FBS(貨號:164210-500)+1% P/S(貨號:PB180120)
培養條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
操作步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等
2、*,專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株,免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片,三天回傳細胞生長狀態圖片,五天內有問題公司負責重發,超過五天時限至一個月內重發細胞收半價,超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠,完善、穩定的實驗體系,優秀的科研隊伍,*的實驗設備、準確可靠的實驗結果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
離子通道蛋白Kv1.3抗體 KCNA3
磷酸化KLF5抗體 phospho-KLF5(Ser272)
磷酸化KLF5抗體 phospho-KLF5(Ser275)
特異性鉀離子通道蛋白抗體 ERG/KCNH2
沉默驅動蛋白KIF4A抗體 KIF4A
ATP敏感鉀離子通道蛋白抗體 kir 6.1
KIAA1462蛋白抗體 KIAA1462
KIAA1549蛋白抗體 KIAA1549
基爾曼氏細小病毒VP1/VP2抗體(大鼠潛在病毒KRV)C端 KRV-VP1+KRV-VP2 (C-terminus)
Kelch樣蛋白20抗體 KLHL20
*抑制劑抗體 KLST
kelch樣蛋白7抗體 KLHL7
TWIK相關酸敏感鉀離子通道蛋白9抗體 KCNK 9
*6抗體 KLK6
*8抗體 KLK8
血漿*抗體 KLKB1
磷酸化抑癌蛋白EZH2抗體 phospho-EZH2 (Thr487)
組蛋白去甲基化酶JARID1B抗體 KDM5B
硫酸角質素抗體 Keratan Sulfate
角質細胞生長因子調節蛋白2抗體 KRG2
鉀離子通道蛋白G蛋白4抗體 KCNG4
鉀通道多聚體結構域KCTD18抗體 KCTD18
胞質接頭蛋白Keap1 KEAP1
舞蹈癥相關蛋白KALRN抗體 KALRN
細胞內流鉀通道蛋白Kir4.1抗體 Kir4.1
樣蛋白3抗體 KIRREL3
KLF樣轉錄因子7抗體 KLF7
Kelch樣蛋白8抗體 KLHL8
鉀離子通道蛋白家族KCNQ2抗體 KCNQ2
鉀離子通道多聚體結構域蛋白7抗體 KCTD7
鉀通道蛋白1抗體 Kv1.1
電壓門控鉀通道蛋白1抗體 KCNAB1
微管驅動蛋白家族成員1A抗體 KIF1A
鉀離子通道蛋白家族成員1抗體 KCNE1
鉀離子通道蛋白家族成員1樣蛋白抗體 KCNE1L
鉀離子通道蛋白家族成員2抗體 KCNE2
Goat Ai-rat IgG/FITC 熒光素標記羊抗大鼠IgG 嬰兒配方食品*(S-Methylmethionine)比色法定量檢測試劑盒 0.3ml
Goat Ai-rat IgM/FITC 熒光素標記羊抗大鼠IgM 茶葉*(S-Methylmethionine)比色法定量檢測試劑盒 0.3ml
Goat Ai-Guinea IgG/FITC 熒光素標記羊抗豚鼠IgG 果菜抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒 0.3ml
Mouse Ai-goat IgG/FITC 熒光素標記小鼠抗羊IgG 食物抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒 0.3ml
Mouse Ai-goat IgM/FITC 熒光素標記小鼠抗羊IgM 酒類抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒 0.3ml
Mouse Ai-human IgG/FITC 熒光素標記小鼠抗人IgG 飲料抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒 0.3ml
Mouse Ai-rabbit IgG/FITC 熒光素標記小鼠抗兔IgG 乳品抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒 0.3ml
Mouse Ai-rat IgG/FITC 熒光素標記小鼠抗大鼠IgG 肉類抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒 0.3ml
Mouse Ai-rat IgM/FITC 熒光素標記小鼠抗大鼠IgM 藥片抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒 0.3ml
Rabbit Ai-MK IgG/FITC 熒光素標記兔抗猴IgG 細胞抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒 0.3ml
Rabbit Ai-MK IgM/FITC 熒光素標記兔抗猴IgM 組織抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒 0.3ml
Rabbit Ai-pig IgG/FITC 熒光素標記兔抗豬IgG 體液抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒 0.3ml
Rabbit Ai-Pig IgM/FITC 熒光素標記兔抗豬IgM 細胞培養液抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒 0.3ml
Rabbit Ai-Dog IgG/FITC 熒光素標記兔抗狗IgG 抗壞血酸待測樣品處理試劑盒 0.3ml
Rabbit Ai-Rat IgG/FITC 熒光素標記兔抗大鼠IgG 通用型*含量比色法定量檢測試劑盒 0.3ml
Rabbit Ai-rat IgM/FITC 熒光素標記兔抗大鼠IgM 血液*含量比色法定量檢測試劑盒 0.3ml
Rabbit Ai- guinea pig IgG/FITC 熒光素標記兔抗豚鼠IgG 組織*含量比色法定量檢測試劑盒 0.3ml
Rabbit Ai- guinea pig IgM/FITC 熒光素標記兔抗豚鼠IgM 食物*含量比色法定量檢測試劑盒