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A7r5（大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞）操作步驟

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更新時(shí)間：2017-08-01 14:32:07瀏覽次數(shù)：199次

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細(xì)胞系

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轉(zhuǎn)化細(xì)胞

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A7r5（大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞）操作步驟售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷(xiāo)售人員，我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱(chēng):A7r5（大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞）操作步驟

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

背景描述

A7r5細(xì)胞培養(yǎng)到穩(wěn)定期后，表現(xiàn)出長(zhǎng)高的肌激酶和肌氨酸磷酸激酶活性(CPK)；A7r5細(xì)胞分裂終止后合成骨肉型CPK。

生長(zhǎng)培養(yǎng)基

DMEM高糖(貨號(hào):PM150210)＋10% FBS(貨號(hào):164210-500)＋1% P/S(貨號(hào):PB180120)

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

細(xì)胞名稱(chēng)	A7r5（大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞）操作步驟
規(guī)格	5×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
價(jià)格	來(lái)電可享受優(yōu)惠

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢(shì)：
1、細(xì)胞株種類(lèi)齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專(zhuān)業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購(gòu)買(mǎi)本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶(hù)收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問(wèn)題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過(guò)五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià)，超過(guò)一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
Phospho-eNOS (Ser1177)
核酪蛋白激酶和細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶底物1抗體 NUCKS1
NIFK蛋白抗體 NIFK
磷酸化NIFK抗體 phospho-NIFK (Thr234)
核轉(zhuǎn)錄因子X(jué)盒結(jié)合蛋白1抗體 NFX1
膜磷脂轉(zhuǎn)移蛋白1抗體 NIR2
神經(jīng)降壓素受體1抗體 Neurotensin Receptor 1
神經(jīng)降壓素受體2抗體 Neurotensin Receptor 2
神經(jīng)組織特異性F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體 Neurabin 1
胞內(nèi)活化的Notch1蛋白抗體 NOTCH1
神經(jīng)鈣傳感蛋白1抗體 NCS1
神經(jīng)元鈣結(jié)合相關(guān)蛋白EFCBP1抗體 NECAB1
膜相關(guān)蛋白樣蛋白NUMBL抗體 NUMBL
嘌呤霉素敏感性氨肽酶蛋白抗體 NPEPPS
N-乙基順丁烯二酰亞胺敏感融合蛋白抗體 NSF
NIPAL2蛋白抗體 NIPAL2
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子HNT抗體 Neurotrimin
軸突蛋白1β/Neurexin 1β抗體 Neurexin 1 beta
*受體3A抗體 NMDAR3A
*受體3B抗體 NR3B
*受體3A+3B抗體 NMDAR3A + 3B
P53誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡抑制蛋白α抗體 NME6
胞質(zhì)5'核苷酸酶1A抗體 NT5C1A
NOC2家族樣蛋白抗體 NOC2L
硝基*抗體 Nitrotyrosine
核蛋白p8抗體 NUPR1
神經(jīng)內(nèi)分泌特異性蛋白2抗體 NSPL2
還原型輔酶Ⅱ氧化酶5/*腺嘌呤二核苷酸磷酸抗體 NOX5
核干細(xì)胞因子抗體(*核苷酸結(jié)合蛋白3) Nucleostemin
尼曼匹克C1前體蛋白抗體 NPC1
*轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/神經(jīng)遞質(zhì)*轉(zhuǎn)運(yùn)體抗體 NET1
核孔復(fù)合體蛋白88抗體 NUP88
核仁蛋白8抗體 NOL8
PSD-95 突觸后密度蛋白95（抗原）等位基因特異性表達(dá)分析試劑盒 0.5mg
BRCA2(Breast cancer susceptbility gene 2) 癌易感基因2抗原基因甲基化程度定量分析試劑盒 0.5mg
PTP-1B (Protein-tyrosine phosphatase, non-receptor ) 蛋白*磷酸酶-1B（抗原）蛋白表位標(biāo)記技術(shù)試劑盒 0.5mg
RAR-Alpha (Retinoic acid -R-Alpha) 維甲酸受體-α 多肽蛋白激酶譜系*分析技術(shù)試劑盒 0.5mg
glycoprotein (E1 glycoprotein) [Rubella virus] 風(fēng)疹病毒糖蛋白多肽片段抗原譜學(xué)分析技術(shù)試劑盒 0.5mg
SAP-1 (Synapse associated protein-I) peptide 突觸相關(guān)蛋白-1（多肽抗原） SELDI蛋白質(zhì)譜分析技術(shù)試劑盒 0.5mg
SARS S-protein(抗原) 高容量細(xì)胞熒光篩選技術(shù)試劑盒 0.5mg
SARS putative orflab polyprotein (SARS coronavirus CUHK-W1)(抗原) 高通量遠(yuǎn)紅外細(xì)胞免疫篩選技術(shù)試劑盒 0.5mg
BSEP peptide 膽汁酸鹽輸出泵蛋白抗原高效液相色譜（HPLC）分析 0.5mg
Secretin 分泌素（抗原）紅外光譜（ESR）分析 0.5mg
Secretin receptor 分泌素受體（抗原）熒光定量分析 0.5mg
Socs 1 (suppressor of cytokine signaling 1) 細(xì)胞激酶信號(hào)-1抑制劑（抗原）紫外可見(jiàn)光分析 0.5mg
SM-MHC(Cardiac myosin heavy chain) 心肌肌凝蛋白多肽化學(xué)發(fā)光分析 0.5mg
Alpha-Synuclein 核突觸蛋白（抗原）質(zhì)譜分析 0.5mg
Alpha-Synuclein 核突觸蛋白（抗原）熒光定量PCR分析 0.5mg
CA15-3 peptide 癌相關(guān)抗原抗原病毒包裝 0.5mg
Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物質(zhì)受體（抗原）薄層色譜分析 0.5mg