【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱:NIT-1(小鼠胰島素瘤β細胞)操作步驟
細胞形態
背景描述
生長培養基
Ham's F-12K(貨號:PM150910)+10% heat-inactivated FBS(貨號:164210-500)+1% P/S(貨號:PB180120)
培養條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
NIT-1(小鼠胰島素瘤β細胞)操作步驟冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
NIT-1(小鼠胰島素瘤β細胞)操作步驟操作步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
NIT-1(小鼠胰島素瘤β細胞)操作步驟優勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等
2、*,專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株,免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片,三天回傳細胞生長狀態圖片,五天內有問題公司負責重發,超過五天時限至一個月內重發細胞收半價,超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠,完善、穩定的實驗體系,優秀的科研隊伍,*的實驗設備、準確可靠的實驗結果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
磷酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體 Phospho-RSK3 (Thr353 + Thr356)
磷酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體 Phospho-RSK3 (Thr356 + Ser360)
磷酸化Ras特異性*核苷酸釋放因子1 Phospho-RASGRF1 (Ser916)
磷酸化核糖體S6激酶RSK2抗體 Phospho-RSK2 (Ser227)
磷酸化核糖體S6激酶RSK2抗體 Phospho-RSK2(Tyr529)
磷酸化原癌基因c-Raf抗體 phospho-c-Raf (Ser259)
磷酸化原癌基因c-Raf抗體 phospho-c-Raf(Ser296)
磷酸化原癌基因c-Raf抗體 phospho-c-Raf(Ser338)
磷酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體 Phospho-Rb (Ser807 + Ser811)
磷酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體 Phospho-Rb (Thr821)
mTOR相關調控蛋白抗體 Raptor
磷酸化mTOR相關調控蛋白抗體 Phospho-Raptor (Ser792)
磷酸化原癌基因c-Raf抗體 phospho-c-Raf (Ser289)
雷帕霉素靶蛋白復合體2抗體 RICTOR
核轉錄因子NFKB-RelB蛋白抗體 RelB
細胞周期檢控Rad17蛋白抗體(復制因子C) Rad17
磷酸化細胞周期檢控Rad17蛋白抗體 Phospho-Rad17 (Ser645)
受體結合**激酶2抗體 RIP2
磷酸化受體結合**激酶2抗體 Phospho-RIP2 (Ser176)
*/*激酶p90RSK蛋白抗體 p90RSK
染色體濃縮調控蛋白1抗體 RCC1
磷酸化染色體濃縮調控蛋白1抗體 Phospho-RCC1 (Ser11)
S6核糖體蛋白抗體 RPS6
核糖體S6蛋白激酶抗體 RPS6KB1
Rad52抗體 Rad52
環指蛋白150抗體 RNF150
T細胞特異性趨化因子抗體 RANTES
晚期糖基化終末產物特異性受體抗體 RAGE
環指蛋白12抗體 RNF12
重組K3蛋白 重組K3蛋白 0.5mg
Snake poison Protein 蛇毒蛋白 0.5mg
Snake poison Protein 蛇毒蛋白 1mg
NIT-1(小鼠胰島素瘤β細胞)操作步驟Batroxobin Protein 蛇毒巴曲酶全蛋白 1mg
Leptin 瘦素(抗原) 0.5mg
Lpin1 protein Lpin1 protein(抗原) 0.5mg
Lumbrokinase 蚯蚓纖溶酶(*抗原) 0.5mg
Livin (Inhibitors of apoptosis proterins Livin) 一種新的凋亡抑制蛋白(抗原) 0.5mg
p38 MAPK/MKK3/MAPKK14 絲裂原活化蛋白激酶p38(抗原) 0.5mg
Metal ion transporter 擬南介金屬離子轉運蛋白(抗原) 0.5mg
MADCAM-1 黏膜選址素(抗原) 0.5mg
MAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG;) 髓鞘相關糖蛋白a/b(抗原) 0.5mg
MAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a ) 髓鞘相關糖蛋白(抗原) 0.5mg
MAG-a (Myelin associated glycoprotein; L-MAG; ) 髓鞘相關糖蛋白-a(抗原) 0.5mg
MMP-1(Mous ematrix metalloproteinases-1) 基質金屬蛋白酶-1(小鼠抗原) 0.5mg
midnolin isoform Protein 1 中腦核仁蛋白1(抗原) 0.5mg
midnolin isoform Protein 2 中腦核仁蛋白2(抗原) 0.5mg
MICA(MHC class I polypeptide-related sequence A) 一種細胞應激分子抗原 0.5mg
MRP3(Multidrug Resistanec-Associated Protein 3) 多藥耐藥相關蛋白3(抗原) 0.5mg
MRP1(Multidrug Resistanec-Associated Protein 1) 多藥耐藥相關蛋白1(抗原) 0.5mg
LRP/MVP (Lung resistance related protein) 肺耐藥相關蛋白(抗原) 0.5mg