【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
1.產(chǎn)品名稱：小鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞操作步驟
2.組織來(lái)源：腦動(dòng)脈組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自腦動(dòng)脈組織；腦動(dòng)脈有成對(duì)的頸內(nèi)動(dòng)脈和椎動(dòng)脈互相銜接成動(dòng)脈循環(huán)；靜脈系多不與同名動(dòng)脈拌行，所收集的靜脈血*入靜脈竇再匯入頸內(nèi)靜脈；各級(jí)靜脈都沒(méi)有瓣膜，它包括腦的動(dòng)脈系統(tǒng)和腦的靜脈系統(tǒng)。腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞主要功能：①維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡；②合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)；③維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡。
本公司的小鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞采用膠原酶-*混合消化法并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；細(xì)胞經(jīng)CD31/vWF免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息：
M199、FBS、內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、Heparin、Ascorbic Acid、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢(shì)：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購(gòu)買本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問(wèn)題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過(guò)五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià)，超過(guò)一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
人Ⅰ型前膠原N端前肽
大鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶
大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶
人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2
小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9
人Ⅰ型膠原C端肽
大鼠脂蛋白磷脂酶A2
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3
人粘蛋白/粘液素5AC
大鼠熱休克蛋白90
人*轉(zhuǎn)氨酶/谷丙轉(zhuǎn)氨酶
大鼠熱休克蛋白70
小鼠補(bǔ)體蛋白4
小鼠腎素
大鼠熱休克蛋白40
人天*轉(zhuǎn)氨酶/谷草轉(zhuǎn)氨酶
大鼠熱休克蛋白20
人肝脂酶
小鼠α2抗纖溶酶
小鼠α2纖溶酶抑制物
人乙酰肝素酶
大鼠β淀粉樣蛋白1-40
大鼠細(xì)胞周期素D3
人Ⅱ型膠原螺旋肽
小鼠泛素蛋白
大鼠細(xì)胞周期素D2
人纖維連接素相關(guān)抗原
小鼠αL艾杜糖苷酸酶
小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶
大鼠細(xì)胞周期素D1
人胃泌素細(xì)胞抗體
人*脫氫酶
小鼠α甘露糖苷酶
大鼠髓磷脂堿性蛋白
人肝素輔因子Ⅱ
大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白
小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ
小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體
人膽酸
大鼠前列腺酸性磷酸酶
大鼠游離前列腺特異性抗原
小鼠α羥基丁酸脫氫酶
人幽門螺旋菌IgG
人γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶
大鼠前列腺特異性抗原
Anti-AMPK Beta1/FITC 熒光素標(biāo)記腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體IgG 0.2ml
Anti-Amylin/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體IgG 0.2ml
Anti-Ang- II /FITC 熒光素標(biāo)記血管緊張素II抗體IgG 0.2ml
Anti-ANG-2/FITC 熒光素標(biāo)記血管生成素-2抗體IgG 0.2ml
Anti-Ankyrin G/ANK-3/ankyrin 3/FITC 熒光素標(biāo)記錨定蛋白G抗體IgG 0.2ml
Anti-ANGPTL1/ANG-1 /FITC 熒光素標(biāo)記血管位蛋白樣1/血管生成素樣蛋白-1抗體IgG 0.2ml
Anti-ANGPTL2/ANG-2 /FITC 熒光素標(biāo)記血管位蛋白樣2/血管生成素樣蛋白-2抗體IgG 0.2ml
Anti-ANGPTL4/ANG-4 /FITC 熒光素標(biāo)記血管位蛋白樣4/血管生成素樣蛋白-4抗體IgG 0.2ml
Anti-Annexin I/FITC 熒光素標(biāo)記人、大、小鼠膜粘連蛋白 I抗體IgG 0.2ml
Anti-Annexin II/FITC 熒光素標(biāo)記膜粘連蛋白-2抗體IgG 0.2ml
Anti-Annexin III /FITC 熒光素標(biāo)記膜粘連蛋白 Ⅲ抗體IgG 0.2ml
Anti-Annexin IV /FITC 熒光素標(biāo)記膜粘連蛋白 Ⅳ抗體IgG 0.2ml
Anti-Annexin V/FITC 熒光素標(biāo)記重組膜粘連蛋白-5(人)抗體IgG 0.2ml
Anti-Annexin VI/FITC 熒光素標(biāo)記膜粘連蛋白 VI抗體IgG 0.2ml
Anti-Anopheles stephensi protein 1/FITC 熒光素標(biāo)記按蚊抗體IgG 0.2ml
Anti-ANP/FITC 熒光素標(biāo)記抗心鈉肽（心鈉素）抗體IgG 0.2ml
Anti-Anthrax/FITC 熒光素標(biāo)記炭疽菌抗體IgG 0.2ml
Anti-Anthrax/FITC 熒光素標(biāo)記炭疽菌抗體（采用活疫苗制備）IgG 0.2ml
Anti-ANXA1(Annexin A1)/FITC 熒光素標(biāo)記膜粘連蛋白A1抗體IgG 0.2ml
Anti-AP/ALP/FITC 熒光素標(biāo)記抗堿性磷酸酶抗體IgG 0.2ml
Anti-beta Adaptin/AP2/FITC 熒光素標(biāo)記銜接蛋白β抗體IgG 0.2ml
Anti- Gamma-Adaptin/FITC 熒光素標(biāo)記銜接蛋白γ抗體IgG 0.2ml
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