【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
1.產(chǎn)品名稱：小鼠腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞操作步驟
2.組織來源：腎組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介：
小鼠腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自腎組織；腎臟是機(jī)體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、*等，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能，生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性*3、前列腺素、激肽等，又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進(jìn)行。腎動脈的分支為葉間動脈，穿行于腎柱內(nèi)，上行至皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處，形成與腎表面平行的弓狀動脈。小葉間動脈向被膜發(fā)出毛細(xì)血管，并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動脈，進(jìn)入腎小囊后形成球形的毛細(xì)血管網(wǎng)，再匯集成出球小動脈，出腎小體。直小動脈分支形成毛細(xì)血管網(wǎng)，再匯合成直小靜脈，入弓狀靜脈、葉間靜脈，zui后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門出腎，注入下腔靜脈。腎動脈既是腎的營養(yǎng)血管，又是腎的機(jī)能血管，與腎泌尿機(jī)能密切相關(guān)。腎動脈在腎實質(zhì)內(nèi)形成兩個毛細(xì)血管網(wǎng)：腎小球毛細(xì)血管網(wǎng)，血壓較高，利于血漿濾過形成原尿；球后毛細(xì)血管網(wǎng)，血壓較低，利于腎小管的重吸收。腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞是腎動脈的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一，在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞主要功能有：①在血漿濾過形成原尿的過程中起重要作用，②在腎小管的重吸收過程中起重要作用，③保持凝血和纖溶的動態(tài)平衡。
本公司的小鼠腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞采用*-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；細(xì)胞經(jīng)CD31/vWF免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息：
M199、FBS、內(nèi)皮細(xì)胞生長添加劑、Heparin、Ascorbic Acid、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過五天時限至一個月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價，超過一個月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實驗體系，優(yōu)秀的科研隊伍，*的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
*G Fc片段
人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B
人C4結(jié)合蛋白
人補(bǔ)體片段3c
人補(bǔ)體7
人β淀粉樣蛋白1-42
人chemerin
人*Ⅻ
人*ⅩⅢ
人*Ⅲ
人補(bǔ)體1q
人血小板膜糖蛋白Ⅳ
人*α1
人補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白
人血小板堿性蛋白
人類白細(xì)胞抗原C
人類白細(xì)胞抗原E
人類白細(xì)胞抗原A
人血清淀粉樣蛋白P
人甘露糖凝集素受體
人纖溶酶/纖維蛋白溶酶
人B細(xì)胞受體
人表面膜免疫球蛋白M
人表面膜免疫球蛋白D
人殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體
人殺傷細(xì)胞凝集素樣受體
人活化蛋白C
人蛋白C
人血小板因子3
人*原片段F1+2
人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素
人膜攻擊復(fù)合物
人優(yōu)球蛋白
人游離血紅蛋白
人*1
人一氧化碳血紅蛋白
人血小板相關(guān)免疫球蛋白
人血小板相關(guān)補(bǔ)體3
人血栓素A2
人血紅蛋白H
人血紅蛋白C
人纖維蛋白
anti-CXCL10/IP-10 /FITC 熒光素標(biāo)記CXCL10趨化因子10/干擾素誘導(dǎo)蛋白10抗體IgG 0.2ml
Anti-CXCL11/ITAC/FITC 熒光素標(biāo)記干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子抗體IgG 0.2ml
Anti-SDF-1/CXCL12 /FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)細(xì)胞衍生因子－1抗體IgG 0.2ml
Anti-CXCL13/BLC-1/FITC 熒光素標(biāo)記B-淋巴細(xì)胞趨化因子抗體IgG 0.2ml
Anti-CXCL14/FITC 熒光素標(biāo)記CXC趨化因子14抗體IgG 0.2ml
Anti-CXCL15/Lungkine/FITC 熒光素標(biāo)記趨化因子CXCL15體IgG 0.2ml
Anti-CXCL16/FITC 熒光素標(biāo)記CXC趨化因子16抗體IgG 0.2ml
Anti-CXC-R1 /FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞表面趨化因子受體1抗體IgG 0.2ml
Anti-CXC-R2/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞表面趨化因子受體2抗體IgG 0.2ml
Anti-CXCR3/CD183/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞表面趨化因子受體3抗體/G蛋白偶聯(lián)受體IgG 0.2ml
Anti-CXCR3/CD183(rat,mo) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗大、小鼠細(xì)胞表面趨化因子受體3抗體IgG 0.2ml
Anti-CXCR5/CD185/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞表面趨化因子受體5抗體IgG 0.2ml
Anti-CXCR6/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞表面趨化因子受體6抗體IgG 0.2ml
Anti-CXCR7/RDC1/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞表面趨化因子受體7抗體IgG 0.2ml
Anti-CXorf36/FITC 熒光素標(biāo)記脫羧酶蛋白體36抗體IgG 0.2ml
Anti-CXorf36/FITC 熒光素標(biāo)記脫羧酶蛋白體36抗體IgG 0.2ml
Anti-Cyclin A/FITC 熒光素標(biāo)記周期素A抗體IgG 0.2ml
Anti-Cyclin B1/FITC 熒光素標(biāo)記周期素B1抗體IgG 0.2ml
Anti-Phospho-Cyclin B1 (Ser147) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化周期素B1抗體IgG 0.2ml
Anti-Phospho-Cyclin B1 (Ser133) /FITC 熒光素
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