【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
1.產(chǎn)品名稱：大鼠虹膜色素上皮細胞操作步驟
2.組織來源：眼球組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介：
大鼠虹膜色素上皮細胞分離自眼球虹膜組織；虹膜是眼睛構造的一部分，屬于眼球中層，位于血管膜的zui前部；在睫狀體前方虹膜，中心有一圓形開口，稱為瞳孔，猶如相機當中可調整大小的光圈，內含色素決定眼睛的顏色。日間光線較為強烈時，虹膜會收蹜，只使一小束光線穿透瞳孔，進入眼睛；當進入黑暗環(huán)境中，虹膜就會往后退縮，使瞳孔變大，讓更多的光線進入眼睛，多數(shù)的脊椎動物的眼睛都有虹膜。虹膜色素上皮細胞(IPE)是虹膜重要結構組成細胞之一，位于虹膜組織的后面，和視網(wǎng)膜色素上皮細胞(RPE)同樣起源于神經(jīng)外胚葉層，可能具有相似的生物學功能，因此對IPE的研究將為防治因RPE結構或功能異常而導致的眼底病提供新思路。
本公司的大鼠虹膜色素上皮細胞采用*-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經(jīng)Cytokeratin-18/PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息：
M199、FBS、上皮細胞生長添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業(yè)的細胞培養(yǎng)技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態(tài)圖片，五天內有問題公司負責重發(fā)，超過五天時限至一個月內重發(fā)細胞收半價，超過一個月重發(fā)全額收費。
5、經(jīng)濟、實惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實驗體系，優(yōu)秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
血管緊張素原(AGT)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Angiotensinogen (AGT) 96T Y17854 Mus musculus (Mouse)
神經(jīng)型一氧化氮合酶()檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal () 96T Y17855 Homo sapiens (Human)
淀粉樣前體蛋白(APP)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Amyloid Precursor Protein (APP) 96T Y17856 Homo sapiens (Human)
胰島素樣生長因子結合蛋白7(IGFBP7)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 7 (IGFBP7) 96T Y17857 Homo sapiens (Human)
含CUB域蛋白1(CDCP1)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for CUB Domain Containing Protein 1 (CDCP1) 96T Y17858 Homo sapiens (Human)
多功能蛋白聚糖(VS)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Versican (VS) 96T Y17859 Homo sapiens (Human)
聚集蛋白聚糖(AGC)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Aggrecan (AGC) 96T Y17860 Homo sapiens (Human)
觸珠蛋白相關蛋白(HPR)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Haptoglobin Related Protein (HPR) 96T Y17861 Homo sapiens (Human)
白介素20(IL20)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 20 (IL20) 96T Y17862 Rattus norvegicus (Rat)
脂肪酸合酶(FASN)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Fatty Acid Synthase (FASN) 96T Y17863 Chicken (Gallus)
酸性葡萄糖苷酶β(GβA)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Glucosidase Beta, Acid (GbA) 96T Y17864 Homo sapiens (Human)
0.2ml
Anti-TrK A/FITC 熒光素標記*激酶A抗體IgG 0.2ml
Anti-TrK A.B.C/TrK /FITC 熒光素標記*激酶A.B.C抗體IgG 0.2ml
Anti-Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) /FITC 熒光素標記磷酸化*激酶A抗體IgG 0.2ml
Anti-Trk B/FITC 熒光素標記*激酶B抗體IgG 0.2ml
Anti-Trk B/FITC 熒光素標記*激酶B抗體IgG 0.2ml
Anti-Trk C/FITC 熒光素標記*激酶C抗體IgG 0.2ml
Anti-Trop-2/gp50/Tpm2 /FITC 熒光素標記原肌球蛋白抗體IgG 0.2ml
Anti-TRPM2 /FITC 熒光素標記瞬時受體電位離子通道蛋白抗體（M亞家族）IgG 0.2ml
Anti-TRP1/gp75 /FITC 熒光素標記*酶相關蛋白1抗體IgG 0.2ml
Anti-TRP2/FITC 熒光素標記*酶相關蛋白2抗體IgG 0.2ml
Anti-Trx/FITC 熒光素標記硫氧還蛋白抗體IgG 0.2ml
Anti-TSARG3/FITC 熒光素標記生精細胞凋亡相關基因3抗體IgG 0.2ml
Anti-TSARG4/FITC 熒光素標記生精細胞凋亡相關基因4抗體IgG 0.2ml
Anti-TSARG6/FITC 熒光素標記生精細胞凋亡相關基因6抗體IgG 0.2ml
Anti-TSARG7/FITC 熒光素標記發(fā)生相關的新基因抗體IgG 0.2ml
Anti-TSFP1/SP1 /FITC 熒光素標記SP1轉錄生長因子抗體IgG 0.2ml
Anti-tsg101/FITC 熒光素標記tsg101抗體IgG 0.2ml
Anti-TSH/FITC 熒光素標記小鼠抗人促甲狀腺素單克隆抗體IgG 0.2ml
Anti-TSHR/FITC 熒光素標記促甲狀腺素受體抗體IgG 0.2ml
Anti-TSHR(CT)/FITC 熒光素標記促甲狀腺素受體抗體（C端）IgG 0.2ml
Anti-TSHR /FITC 熒光素標記促甲狀腺素受體抗體IgG 0.2ml
Anti-TSHR(NT)/FITC 熒光素標記促甲狀腺素受體抗體（N端）IgG 0.2ml
Anti-TSH/FITC 熒光素標記促甲狀腺素抗體IgG 0.2ml
Anti-TSH/Biotin *化促甲狀腺素抗體IgG
