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小鼠胚胎成纖維細胞;PA317實驗方法

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

聯(lián)系方式:陳小姐查看聯(lián)系方式

更新時間:2017-07-25 14:03:27瀏覽次數(shù):170次

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經(jīng)營模式:經(jīng)銷商

商鋪產(chǎn)品:9896條

所在地區(qū):上海上海市

聯(lián)系人:陳小姐 (銷售)

產(chǎn)品簡介

小鼠胚胎成纖維細胞;PA317實驗方法售后:收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細介紹

細胞名稱  小鼠胚胎成纖維細胞;PA317實驗方法
形態(tài)特性   成纖維細胞樣 
生長特性  貼壁生長
特征特性   PA317細胞株源自TK- NIH/3T3細胞,通過pBR322中的包裝結(jié)構(gòu)DNA(pPAM3)和pBR322中的單純皰疹病毒胸苷激酶基因共同轉(zhuǎn)染構(gòu)建而成。通過感染或轉(zhuǎn)染將逆轉(zhuǎn)錄病毒載體導(dǎo)入這些細胞,生成可以感染許多哺乳動物細胞的雙嗜性載體顆粒。這株細胞生成的病毒顆粒已成功地用于將基因?qū)肴梭w??赡芤驗檗D(zhuǎn)入DNA丟失,能夠包裝逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的PA317細胞百分比隨傳代而減少。在含0.03 mM 次黃嘌呤, 0.001 mM 氨甲喋呤和0.02 mM 胸苷的培養(yǎng)基中短暫(大約5天)選擇,可以選出保留了包裝功 
培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS 
傳代方法   1:10傳代,5~10天一次,2~3天換液1次
傳代情況  C3
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS 
支原體檢測  培養(yǎng)法(-) 
STR   -
同工酶  
染色體   22~29;58~64
使用權(quán)限  A類

細胞名稱小鼠胚胎成纖維細胞;PA317實驗方法
生長特性 貼壁生長
價格來電可享受優(yōu)惠

優(yōu)勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內(nèi)膜細胞等
2、*,專業(yè)的細胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細胞株,免費復(fù)蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片,三天回傳細胞生長狀態(tài)圖片,五天內(nèi)有問題公司負責重發(fā),超過五天時限至一個月內(nèi)重發(fā)細胞收半價,超過一個月重發(fā)全額收費。
5、經(jīng)濟、實惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實驗體系,優(yōu)秀的科研隊伍,*的實驗設(shè)備、準確可靠的實驗結(jié)果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
脊椎蛋白1(SPON1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    
互聯(lián)蛋白神經(jīng)元中間絲蛋白α(INα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    
Lin-28同源物A(LIN28A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    
組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    
受磷蛋白(PLN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    
無翅型MMTV整合位點家族成員3A(WNT3A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    
再生胰島衍生蛋白3γ(REG3γ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    
蘭尼定受體1(RYR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    
核因子I/B(NFIB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    
R-脊椎蛋白1(RSPO1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    
神經(jīng)顆粒素(NRGN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    
橋粒聯(lián)結(jié)蛋白(AHNAK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    
肌鈣蛋白T(TNT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    
分泌跨膜蛋白1(SECTM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    
肥大細胞類*1(CMA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    
無翅型MMTV整合位點家族成員3(WNT3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    
無翅型MMTV整合位點家族成員2(WNT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    
無翅型MMTV整合位點家族成員1(WNT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    
序列相似家族5成員C(FAM5C)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    
白1抗體 
 Kir6.2  ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗體 
 GIRK2/Kir3.2  G蛋白激活內(nèi)流鉀通道蛋白2抗體 
 AVPR2  *加壓素受體2抗體 
 Bdkrb2/B2R  緩激肽B2受體抗體 
 Axin1  軸蛋白1抗體 
 Anei-ATX/Autotaxin  自分泌運動因子抗體 
 Aurora A/ARK-1/AURKA  有絲分裂激酶A抗體 
 Aurora B/STK-1  有絲分裂激酶B抗體 
 phospho-PTPRA(Tyr798)  磷酸化*磷酸酶α抗體 
 phospho-PTPRA(Ser180)  磷酸化*磷酸酶α抗體 
 Aurora C  有絲分裂激酶B抗體 
 Aurora A/B/C  有絲分裂激酶A/B/C抗體 
 LEO1  RNA聚合酶相關(guān)蛋白LEO1抗體 
 B7-H1/PD-L1/CD274  程序性死亡配體1抗體 
 B7-DC/CD273/PDL2  程序性死亡配體2抗體 
 ICOS-L/B7-H2/CD275  誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子配體CD275抗體 
 phospho-LEO1(Ser551)  磷酸化RNA聚合酶相關(guān)蛋白LEO1抗體 
 ICOS-L/B7-H2/CD275  誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子配體CD275抗體 
 CT054/C20orf54  核黃素轉(zhuǎn)運蛋白2抗體 
 ZDHHC21  γ-氨基丁酸A受體相關(guān)膜蛋白3 
 ASGPR1/ASGR1  唾液酸糖蛋白受體1抗體 
 ITPR1  5-三磷酸肌醇受體1抗體 
 GPI  糖磷脂酰肌醇抗體 
 B7H4  B7-H4抗體 
 ITPR2  5-三磷酸肌醇受體2抗體 
 BAAT  長鏈脂肪酸酰基*水解酶抗體 
 Exendin 4  GLP1類似蛋白Exendin4抗體 
 BACE1/ASP2  β分泌酶抗體 
 phospho-BACE1(Ser498)  磷酸化β分泌酶抗體 
 Phospho-Bad(Ser118)  磷酸化相關(guān)死亡促進因子抗體 
 


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