【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 小鼠胚胎成纖維細胞(來自NIH3T3);PA12操作步驟
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞來自NIH/3T3,可作逆轉錄病毒的包裝細胞。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
小鼠胚胎成纖維細胞(來自NIH3T3);PA12操作步驟冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
小鼠胚胎成纖維細胞(來自NIH3T3);PA12操作步驟操作步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
小鼠胚胎成纖維細胞(來自NIH3T3);PA12操作步驟優勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等
2、*,專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株,免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片,三天回傳細胞生長狀態圖片,五天內有問題公司負責重發,超過五天時限至一個月內重發細胞收半價,超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠,完善、穩定的實驗體系,優秀的科研隊伍,*的實驗設備、準確可靠的實驗結果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
疫吸附試驗法)
*豐富鈣結合蛋白(HRC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
MYC關聯因子X(MAX)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
*豐富α2-糖蛋白1(LRG1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
二氫嘧啶脫氫酶(DPYD)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
解聚蛋白(DSTN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
*S轉移酶ω1(GSTω1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
血小板反應蛋白解整合素金屬肽酶5(ADAMTS5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
組織蛋白酶Z(CTSZ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
真核翻譯起始因子6(EIF6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
核糖核酸酶Ⅲ(RNASEN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
乙酰*酯酶關聯蛋白(ACHAP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
活性依賴性神經保護因子(ADNP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
腦富含膜附著信號蛋白1(BASP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
小泛素相關修飾蛋白2(SUMO2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Adropin蛋白(AD)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
蛋白酶激活受體4(PAR4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
聚集蛋白聚糖(AGC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
成纖維細胞生長因子受體樣蛋白1(FGFRL1)檢測試劑
小鼠胚胎成纖維細胞(來自NIH3T3);PA12操作步驟DNA依賴性蛋白激酶抗體
phospho-DNA PK/PRKDC(Ser2612) 磷酸化DNA依賴性蛋白激酶抗體
Dnmt1 DNA甲基轉移酶1抗體
SMAGP 小細胞跨膜糖化蛋白抗體
phospho-Dnmt1(Ser154) 磷酸化DNA甲基轉移酶1抗體
phospho-Dnmt1(Ser732) 磷酸化DNA甲基轉移酶1抗體
phospho-Dnmt1(Tyr399) 磷酸化DNA甲基轉移酶1抗體
phospho-Dnmt1(Tyr969) 磷酸化DNA甲基轉移酶1抗體
Dnmt3a DNA甲基轉移酶-3α抗體
TAG1/CNTN2 瞬時表達軸索糖蛋白1抗體
ADAM12/MLTN 去整合素樣金屬蛋白酶12抗體
Dnmt3 Beta DNA甲基轉移酶-3β抗體
DNAPK/PRKDC DNA依賴蛋白激酶催化亞基抗體
DNPK1 DNA依賴蛋白激酶催化亞基抗體
DOG-1/TMEM16A 跨膜蛋白16A/鈣激活氯離子通道抗體
DOK1 D*激酶衰減蛋白1抗體
phospho-DOK1(Tyr362) 磷酸化D*激酶衰減蛋白1抗體
phospho-DOK1 (Tyr398) 磷酸化D*激酶衰減蛋白1抗體
DOK2 D*激酶衰減蛋白2抗體
Phospho-p56Dok2(Tyr351) 磷酸化D*激酶衰減蛋白2抗體
Phospho-p56Dok2(Tyr299) 磷酸化D*激酶衰減蛋白2抗體
Phospho-p56Dok2(Tyr142) 磷酸化D*激酶衰減蛋白2抗體
DP1/TFDP1 轉錄因子DP1抗體
DPPA2/PESCRG1 多能發育相關基因2抗體
ADAM15 去整合素樣金屬蛋白酶15抗體
DR3/APO3/TWEAK 死亡受體3抗體
ADAM18 去整合素樣金屬蛋白酶18抗體