K599 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*10圖片細(xì)胞的種類:
*種:
是凍存產(chǎn)品,由液氮直接拿出,干冰運輸給客戶。一般不*這種,也較少使用這種方式,因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲存的zui好方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運輸也對細(xì)胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,*進(jìn)口來源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
K599 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*10圖片操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富,可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃,225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時,30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率,若轉(zhuǎn)化control pUC19計算轉(zhuǎn)化效率,則需37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。
6. 將平板倒置放于37℃或30℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
?
K599 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*10圖片注意事項:
1. 感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。
? 大鼠肝癌細(xì)胞;CBRH-7919 [CBRH7919]
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7
A2M Others Human 人 A2M / CPAMD5 / Alpha-2-macroglobulin 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
HFL-I細(xì)胞,胚肺成纖維細(xì)胞 人小腸癌細(xì)胞系,HIC細(xì)胞 CM-R061大鼠腎動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人心肌細(xì)胞HCM
TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b / TEK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人氣管上皮細(xì)胞RNAHTEpiC miRNA5 μg
狗間葉干細(xì)胞(脂肪)(5×105)
小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L2
615小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤瘤株;DCS 小鼠軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
細(xì)胞名稱 種屬
EFNA5 Others Mouse 小鼠 EFNA5 / Ephrin-A5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠肝癌細(xì)胞;CBRH-7919 [CBRH7919]
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7
A2M Others Human 人 A2M / CPAMD5 / Alpha-2-macroglobulin 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
HFL-I細(xì)胞,胚肺成纖維細(xì)胞 人小腸癌細(xì)胞系,HIC細(xì)胞 CM-R061大鼠腎動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人心肌細(xì)胞HCM
TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b / TEK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
Ferrouslactate乳酸低鐵500毫克BR,90%
631-61-8乙酸銨AMMONIUM ACETATE
1%純度奈啶酮酸溶液shēng huà shì jì容量:1米
2-巰基苯并噻唑 2-Mercaptobenzothiazole,97% 149-30-4 25G 通用試劑
C (常規(guī)) Mitomycin C from Streptomyces caespito... 1950-7-7 2MG 通用試劑
免疫血清兔抗狗IgGshēng huà shì jì容量:50片/盒
NA
橙黃Ⅰ250克2~8°C
壬二酸二辛酯 Bis(2-ethylhexyl) Azelate,98% 103-24-2 25ML 通用試劑
蘭速拉坐相關(guān)物質(zhì)A Lcnsoprczolq Rqlctqd CoMpound c;2-[[[3-Mqthyl-4-(2,2,2-triflouroqthoxy)-2-pyridyl]Mqthyl]sulfonyl]bqnziMidczolq 13196-99-3
K599 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*10圖片*1克2~8℃,避光
23519-77-9正丙醇鋯 70 WT. % SOLUT&ZIRCONIUM N-PROPOXIDE
3-bromo-4-(bromometxyl)thiopxene 40032-80-2
乙酰檸檬酸三丁酯(A... Tributyl 2-acetylcitrate,≥99.0% 77-90-7 100ML 通用試劑
帕帕泥科拉屋氏染色劑 Nc
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