EHA101 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*50規(guī)格操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營(yíng)養(yǎng)豐富,可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃,225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時(shí),30℃培養(yǎng)可降低錯(cuò)誤重組的概率,若轉(zhuǎn)化control pUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率,則需37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。
6. 將平板倒置放于37℃或30℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。
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EHA101 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*50規(guī)格注意事項(xiàng):
1. 感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。
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Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256
人胚肺細(xì)胞系;KuMA
MAPK13 Others Human 人 p38 delta / MAPK13 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
EL4細(xì)胞,淋巴瘤細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞,SW480細(xì)胞 CM-H045人肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
口腔角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基OKM
VLDLR Others Human 人 VLDLR / VLDL Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人前脂肪細(xì)胞-皮下cDNAHPA-s cDNA
小鼠心肌細(xì)胞(MCM)(1×106)
正常大鼠腎細(xì)胞;NRK-52E
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2F8 小鼠角膜成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
HUM, 正常人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 Human
EFNA1 Others Mouse 小鼠 EFNA1 / Ephrin-A1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256
人胚肺細(xì)胞系;KuMA
MAPK13 Others Human 人 p38 delta / MAPK13 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
EL4細(xì)胞,淋巴瘤細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞,SW480細(xì)胞 CM-H045人肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
口腔角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基OKM
VLDLR Others Human 人 VLDLR / VLDL Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
5-nitnouracil2,4-二羥基-5-硝基嘧啶25克BR,97%
GDX 201(聚二本多孔小球)NA
L-酪酸叔丁酯,英文名或英文縮寫:L-Tyrosine tert-butyl ester,級(jí)別:特純,98%,規(guī)格:5克
三坐同 1,2,4-Triczolo[4,3-c]pyridin-3(2H)-onq 6969-71-7
分子篩13X型 MOLqCULcR SIqVq 6331-69-6
免疫血清兔抗羊IgG1000只/袋
107-89-1丁醇醛ALDOL
次*shēng huà shì jì容量:10克
* Amikacin sulfate salt 39831-55-5 5G 通用試劑
羌鈷安速(+4`C) xy7noxocobclcmin 134-21-0
EHA101 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*50規(guī)格鎳絲,英文名或英文縮寫:Nickel,級(jí)別:CP,99%,規(guī)格:250毫克
6047-25-2草酸亞鐵 二水合物Ferrous oxalate dihydrate
1-Bromometxyl-4-nitnonepxtxelene 16855-41-7
3- 3-Fluorothiophenol,≥98.0 % 2557-77-9 1G 多肽試劑
葡聚糖500U2~8℃
EHA101 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*50規(guī)格細(xì)胞的種類:
*種:
是凍存產(chǎn)品,由液氮直接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶。一般不*這種,也較少使用這種方式,因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒(méi)操作好;另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式,快遞時(shí)間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過(guò)后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),*進(jìn)口來(lái)源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。