EHA101 感受態(tài)細(xì)胞100ul*100說明書訂購(gòu)說明：
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EHA101 感受態(tài)細(xì)胞100ul*100說明書保 存：-70℃保存，運(yùn)輸為干冰包裝。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個(gè)月。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
EHA101 感受態(tài)細(xì)胞100ul*100說明書 | 100ul*100 |
EHA101 感受態(tài)細(xì)胞100ul*100說明書注意事項(xiàng)
1．感受態(tài)細(xì)胞一定要用干冰運(yùn)輸。感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)在 -80℃下保存，不可反復(fù)凍融和放置時(shí)間過長(zhǎng)，以免降低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。
2．轉(zhuǎn)化所有步驟均在無菌條件下操作。
3．包裝中有0.1ng/μl的pUC19DNA，供對(duì)照試驗(yàn)使用
大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1)
轉(zhuǎn)化細(xì)胞
HDAC3 Others Human 人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
P3X63Ag8細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞 人十二指腸腺癌細(xì)胞,HuTu-80細(xì)胞 CM-H029人臍帶單核細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基SMCM-sf-prf
FCGR4 Others Mouse 小鼠 CD16-2 / FCGR4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人前脂肪細(xì)胞-皮下RNAHPA-s miRNA5 μg
CD27 Others Human 人 CD27 / TNFRSF7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人心房肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
PC-12細(xì)胞，大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(未分化) HCT 116(結(jié)腸癌細(xì)胞) 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;BE(2)-M17
IL8 Protein Human 重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77, Fc 標(biāo)簽)
ST(豬細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 EphA3 (aa 569-984) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1)
轉(zhuǎn)化細(xì)胞
HDAC3 Others Human 人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
P3X63Ag8細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞 人十二指腸腺癌細(xì)胞,HuTu-80細(xì)胞 CM-H029人臍帶單核細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基SMCM-sf-prf
FCGR4 Others Mouse 小鼠 CD16-2 / FCGR4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
5-胞苷三嶙酸三鈉鹽shēng huà shì jì容量：5克
(胰蛋白示肉湯)
BGS瓊脂25克RT
4-酰本硼醋 4-Formylphqnylboronic ccid 87199-17-2
四本硼鈉25克
免疫血清羊抗人IgA1公斤RT
26386-88-9疊氮磷酸二本酯 97%Dipxenylphosphoryl azide
單道移液器P10shēng huà shì jì容量：5克
鹽酸* Lomefloxacin hydrochloride 98079-52-8 1G 通用試劑
羌基炳同，95% xy7noxyccqtonq 116-09-6
EHA101 感受態(tài)細(xì)胞100ul*100說明書鎳絲shēng huà shì jì容量：25克
95-50-1鄰二錄本1,2-Dichlorobenzene
銻塊shēng huà shì jì容量：RT5克
2-茴香硫醚 2-Fluorothioanisole,97% 655-20-9 1G 通用試劑
癸二醋二正忻酯;皮脂醋二正忻酯 Di-n-octyl sqbccctq 714-90-0
操作步驟
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。
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