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即用型 PCR 試劑盒 2.0 9 mL原理

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更新時間:2017-01-19 14:24:12瀏覽次數:290次

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產品簡介

即用型 PCR 試劑盒 2.0 9 mL原理運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細介紹

即用型 PCR 試劑盒 2.0 9 mL原理產品介紹:

即用型 PCR 試劑盒 2.0 9 mL原理產品及特點:

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。

合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。

N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲基本胺鈉鹽
〖英文名稱〗:TOPS sodium salt;Sodium 3-(N-ethyl-3-methylanilino)propanesulfonate;3-(N-Ethyl-3-methylanilino)propanesulfonic acid sodium salt
〖其他名稱〗:N-乙基-N-(3-磺丙基)間甲苯胺鈉鹽
〖CAS號〗:40567-80-4
C12H18NNaO3S=279.33
〖級別〗:試劑級
〖含量〗:≥98%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色結晶粉末。溶于水
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)酶光度法測定過氧化輕的水溶性試劑。
〖保存〗:RT,避光。保質期5年
雙向電泳指示劑
〖英文名稱〗:Tracking Dye-2D
〖級別〗:Proteomics
〖折光率〗:1.37~1.41
比重:1.149~1.159
Protease:None detected
產品描述:Premixed,ready-to-use,and a great complimentary product.This tracking dye very accuray monitors the progress of the 2nd dimension gel during the 2D electrophoresis process.
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:澄清紫色液體
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗:-20℃

T3 體外轉錄試劑盒    牛血清 γ 球蛋白標準品,2mg/mL
T3 體外轉錄試劑盒    預稀釋 BSA 蛋白標準品
雙酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)    SDS-PAGE 樣品制備試劑盒
一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒    糖蛋白染色試劑盒
一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒    磷酸蛋白染色試劑盒
動植物膜蛋白微量制備試劑盒    *標簽蛋白染色試劑盒
α- 環狀糊精    天然蛋白 A
L(+) 鼠李糖    重組蛋白 A
硫酸肼    重組蛋白 G
*七水    重組蛋白 A/G
氯化鈣,二水    重組蛋白 L
硼酸    天凈沙 Rib


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