Cy3-dCTP 溶液,10mM25μL實驗步驟使用方法:
一、交換反應 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應液: 成分 加入的體積 自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶(10 U/μL) 1 μL 滅菌的超純水 補足到 25 μL 注:5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。 8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質時,請在第
8 步之后進行。
Cy3-dCTP 溶液,10mM25μL實驗步驟產品介紹:

Cy3-dCTP 溶液,10mM25μL實驗步驟磷酸化反應標記:
A. 去磷酸化反應
1. 實驗前需自備的試劑:TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)等 2. 在微量離心管中制備下列反應液: 成分 加入的體積 自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl,pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶 (CIAP,10~20 U/μL)
2 μL 滅菌的超純水 補足到 150 μL
3. 50℃反應 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//(25:24:1),充分混勻。
5. 離心,取上層(水層)移到另一個微量離心管中。
6. 重復操作 4~5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl(zui終濃度 150 mM)。
8. 加入 375 μL(2.5 倍量)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
9. 離心回收沉淀,用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后,沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
Cy3-dCTP 溶液,10mM25μL實驗步驟磷酸化反應(前反應):
1. 在微量離心管中制備下列反應液:

2. 37℃反應 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標記:
當摻入水平很低的時候,需要使用本步驟,即通過體積排阻色譜或過濾試 劑盒除去未反應的標記。Sephadex G-50 層析柱(需另購)對于去除未摻入 的 dNTPs 效果很好,它還能大幅減少小于 20 個堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5~10 分鐘以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來純化長度不小于 10 個 堿基的寡核苷酸。
30%葡萄糖溶液(PH6.5±0.5)250g用于嗜滲酵母檢驗時的樣品稀釋(GB標準)
Pfizer 腸球菌選擇性瓊脂 250(g) incubation media Pfizer 腸球菌選擇性瓊脂 250(g)
支原體肉湯培養基 Mycoplasma Broth 250克 用于培養支原體的基礎培養基
*3mg/支*5每支添加于HB4ncubationmedia*3mg/支*5每支添加于HB4155
改良亞鹽瓊脂 250g 用于嗜熱菌芽孢(需氧芽孢總數,平酸芽孢和厭氧芽孢)的分離培養和計數(SN標準)
30%DextroseBroth
Todd-Hewitt 肉湯 250(g) incubation media Todd-Hewitt 肉湯 250(g)
BBE瓊脂 BBE Agar 250克 脆弱擬桿菌的分離培養
糖發酵基礎肉湯250適用于微生物檢驗中各種糖發酵實驗,無菌加入各種糖醇類物質(SN標準)incubationmedia糖發酵基礎肉湯250適用于微生物檢驗中各種糖發酵實驗,無菌加入各種糖醇類物質(SN標準)
SulfiteAgar,modified
0.性美藍染色液5ml*6支/盒用于酵母菌鏡檢染色。
牛心湯培養基 250(g) incubation media 牛心湯培養基 250(g)
溴百里酚藍乳糖*瓊脂 Cystine-Lactose-Electrolyte Deficient Agar 250克 尿液中微生物的選擇性分離培養
李氏菌增菌肉湯(LB)基礎250添加奈啶酮酸,吖啶黃素,即為LB,用于李氏菌二步增菌(GB標準)incubationmedia李氏菌增菌肉湯(LB)基礎250添加奈啶酮酸,吖啶黃素,即為LB,用于李氏菌二步增菌(GB標準)
蛋白胨鹽溶液 250g 用于嗜冷菌需氧芽孢及嗜熱需氧芽孢數測定用稀釋液
YPDA培養基250g用于酵母菌增菌培養
BBL瓊脂培養基基礎 250(g) incubation media BBL瓊脂培養基基礎 250(g)
CLED培養基添加劑 CLED Medium Supplement 1毫升×5支 加入100mlC.L.E.D培養基中
萘啶酮酸4.5mg*5添加于225mlHB4成LBubationmedia萘啶酮酸4.5mg*5添加于225mlHB4成LB1
PeptoneSaltSolution
YPDAMedium
BL瓊脂培養基 250(g) incubation media BL瓊脂培養基 250(g)
PEA瓊脂 PEA Agar 250克 從含革蘭氏陰性菌的標本中分離培養革蘭氏陽性菌
吖啶黃素2.7mg*5添加于225mlHB4成LBubationmedia吖啶黃素2.7mg*5添加于225mlHB4成LB1
亞鐵瓊脂 250g 用于厭氧亞鹽還原梭菌的計數
DTM添加劑*5每支添加于200mlDTM培養基中
MFC培養基 250(g) incubation media MFC培養基 250(g)
NTM培養基 NTM Medium 250克 淋球菌的分離培養
七葉苷培養基試驗培養基,用于細菌七葉苷利用試驗(SN標準)incubationmedia七葉苷培養基試驗培養基,用于細菌七葉苷利用試驗(SN標準)
檢定培養基 250g 用于嗜熱脂肪芽孢桿菌檢定培養
DTM添加劑2每支添加于200mlDTM培養基中
改良胰蛋白胨大豆肉湯(mTSB) 250(g) incubation media 改良胰蛋白胨大豆肉湯(mTSB) 250(g)
伊格爾培養基 SMEM 10升 細胞培養用
半固體動力培養基250用于動力觀察,菌種保存,H抗原位相變異試驗等(SN標準)incubationmedia半固體動力培養基250用于動力觀察,菌種保存,H抗原位相變異試驗等(SN標準)
TestMedium
Cy3-dCTP 溶液,10mM25μL實驗步驟C21H18O5S=382.43
〖級別〗:IND
PH變色域:pH 1.2(紅)~2.8(黃); pH 7.4(黃)~9.0(紅紫)
乙醇溶解試驗:合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:棕綠色細小結晶性粉末。易溶于乙醇、甲醇、冰乙酸和堿溶液,在乙酸中呈黃色溶液,稀堿液和氨水中呈紅紫色,微溶于水,不溶于乙迷、苯、氯方、四錄化碳和乙酸乙酯。zui大吸收波長 579(371)nm
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)酸堿指示劑
〖保存〗:RT
二苯胺磺酸鈉
〖英文名稱〗:Diphenylaminesulfonic acid sodium salt;Sodium diphenylamine-4-sulfonate
〖其他名稱〗:二苯胺-4-磺酸鈉;4-(苯氨基)苯磺酸單鈉鹽;4-二苯胺磺酸鈉;二苯胺對磺酸鈉;二苯基氨基-4-磺酸鈉
〖CAS號〗: