DNA 電泳分子量標準 (3)φX174 DNA/Hae Ⅲ50 次實驗步驟使用方法:
一、準備工作 1. 用固相 RNase 清除劑清潔工作的臺面和器皿(詳見該產品的使用手冊)。 2. 配制 1 X 電泳緩沖液 將適量的 10X 電泳緩沖液用 RNase-free 水稀釋 10 倍,得到 1X 電泳緩 沖液待用。 3. 配制 10%過硫酸銨溶液 精確稱取約 100 mg 過硫酸銨到一干凈的 1.5 mL 離心管中,按每 1 mg 過硫酸銨加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水,搖晃致溶, 立即使用。注意:放置時間不要超過一周。
二、配制凝膠 1. 估計所需要的凝膠溶液的體積,一般配制一塊 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的膠需要 15 mL 凝膠溶液,配制一塊 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的膠 需要 120 mL 凝膠溶液。 2. 新鮮的 40%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液的配制:在裝有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入約 130 mL 自備的去離子水,然后將全部甲叉雙丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液沖洗出來以避免粉末有 毒粉末飄出。甲叉雙丙烯酰胺溶解度低,不會溶解在這少量溶液中)。充 分搖晃混勻后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是這樣可以在下步留出足夠空間加尿素。
3. 根據所需要的凝膠溶液的體積,在一的干凈的三角瓶中按下表加入各成分 (此處以配制 100mL 濃度為 15%的凝膠為例):

4. 攪拌并加熱到 40-50℃左右,直到尿素*溶解。
5. 冷卻到室溫后,將三角瓶接上真空系統抽真空處理 10-15 分鐘以充分去 除溶液中的氧氣(氧氣會降低聚合反應效率)。但如果實驗條件有限,此 步也可以省略。
6. 邊搖晃溶液變加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%過硫酸銨。注意:即 使選擇其他工作濃度的 Acrylamide/Bis,TEMED 和 10%過硫酸銨的用 量也不需要隨之改變。但如果配置的凝膠溶液的體積變化,TEMED 和 10%過硫酸銨的用量也要按比例改變。
7. 再充分搖晃約 30 秒后迅速灌膠,然后插入樣品梳。
8. 室溫放置 30-60 分鐘使膠凝固。
9. 將凝膠板放置在電泳裝置上后,在上下層分別加入適當量的 1X 電泳緩沖 液。如果不馬上使用,需要有濕紙將上樣孔端蓋住以防凝膠過度干燥。
10. 拔出梳子后用加樣槍吸取電泳緩沖液,充分將每個加樣空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和氣泡吹打出來。
DNA 電泳分子量標準 (3)φX174 DNA/Hae Ⅲ50 次實驗步驟產品及特點:
尿素-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Urea PAGE)是目前分離 200 nt 以下的小片段 RNA,尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是單獨 配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
1. 一站式,含有電泳所需要的所有試劑,即開即用,十分方便,免去了 實驗人員稱取有毒物品。
2. 靈活,可以根據需要配制各種濃度的 Urea-PAGE,以便對長度各異 的 RNA 進行電泳。
3. 電泳后可直接用于 UV 觀察、銀染、膠回收、Northern 雜交和放射自 顯影等。
4. 使用新型緩沖液,可以防止甘油的干擾。
DNA 電泳分子量標準 (3)φX174 DNA/Hae Ⅲ50 次實驗步驟產品介紹:

〖英文名稱〗:D-Panthenol ;Dexpanthenol;(+)-Panthenol;(R)-(+)-2,4-Dihydroxy-N-(3-hydroxypropyl)-3,3-dimethylbutyramide;(R)-2,4-Dihydroxy-3,3-dimethylbutyric 3-hydroxypropylamide; D-Pantothenyl alcohol;Provitamin B
〖其他名稱〗:右旋泛醇;(R-)2,4-二羥基-N-(3-羥基丙基)-3,3-二甲基丁酰胺;D-(+)-2,4-二羥基-N-(3-羥丙基)-3,3-二甲基丁酰胺;*;右旋泛酰醇;D-泛酰醇;維生素原B5
〖CAS號〗:81-13-0
C9H19NO4=205.25
〖級別〗:AR
〖含量〗:≥98.0%
〖比旋光度〗:+29.0~+31.5o
水分:≤1.0%
〖灼燒殘渣〗:≤0.1%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:液體。在水溶液中較穩定,但長時間加熱引起外消旋作用。溶于水,乙醇,甲醇,氯方,微溶于乙迷。不溶于脂肪和油。密度:1.20,沸點:118-120℃
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
麥芽糖醇
〖英文名稱〗:Maltitol;4-O-alpha-Glucopyranosyl-D-sorbitol;4-O-alpha-D-Glucopyranosyl-D-glucitol
〖其他名稱〗:氫化麥芽糖;4-O-alpha-吡喃葡萄糖基-D-山梨糖醇;4-O-2-D-乙二醇吡喃山絮糖醇
〖CAS號〗:585-88-6
C12H24O11=344.31
〖級別〗:BR
DNA 電泳分子量標準 (3)φX174 DNA/Hae Ⅲ50 次實驗步驟Actinomycetesculturemedium
PBS,(10X) pH 7.2 70013-032 500ml incubation media PBS,(10X) pH 7.2 70013-032 500ml
假單胞菌 支/瓶
TCBS瓊脂平板(9cm)用于致病性弧菌的選擇性分離
大豆酪蛋白瓊脂培養基(TSA) 1kg 用于醫藥工業潔凈室(區)沉降菌的測試(GB/T 16294-2010)
改良GAM瓊脂250g用于脆弱抑桿菌的分離培養
PBS,(1X) pH 7.4 10010-023 500ml incubation media PBS,(1X) pH 7.4 10010-023 500ml
假交替單胞菌 產* 支/瓶
ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar
TryptoseSoyaAgar
GAMAgar,Modified
10010-031 1000ml incubation media 10010-031 1000ml
假結核耶爾森氏菌 食用和藥用 支/瓶
玫瑰紅鈉瓊脂平板(9cm)用于霉菌、酵母菌計數
胰蛋白胨大豆肉湯培養基(TSB) 1kg 用于藥品線無菌灌裝試驗
改良GAM肉湯250g用于脆弱抑桿菌的增菌培養
PBS,(10X) pH 7.4 70011-044 500ml incubation media PBS,(10X) pH 7.4 70011-044 500ml
假芝 支/瓶
RoseBengalMedium
TryptoseSoyaBroth
GAMBroth,Modified
RPMI 1640,(1X),液體(IVD) 含L-* 11875-093 500ml incubation media RPMI 1640,(1X),液體(IVD) 含L-* 11875-093 500ml
尖鐮孢 支/瓶
*瓊脂平板(9cm)用于霍亂弧菌的分離培養
2010版中國藥典增補培養基
液體 含1000mg/l葡萄糖,