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小鼠雜交瘤細胞;IIID12-G7復蘇

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產(chǎn)品型號

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所  在  地上海市

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更新時間:2017-02-10 10:13:17瀏覽次數(shù):135次

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產(chǎn)品簡介

小鼠雜交瘤細胞;IIID12-G7復蘇現(xiàn)貨供應,質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

詳細介紹

小鼠雜交瘤細胞;IIID12-G7復蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務。

產(chǎn)品名稱生長特性發(fā)貨地貨期
小鼠雜交瘤細胞;IIID12-G7復蘇半貼壁生長上海3-5天

細胞名稱  
形態(tài)特性   淋巴母細胞樣
生長特性  半貼壁生長
特征特性   可產(chǎn)生單克隆抗體。 
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況  C30
凍存條件   基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  A類

細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
N-羥基-5-降*烯-2,3-二甲酰亞胺    shēng huà shì jì    容量:    RT    25克
N-甲基乙酰胺    shēng huà shì jì    容量:        500克
N-甲基吩嗪甲基硫酸鹽    shēng huà shì jì    容量:        25克
N-甲基-D-葡糖胺    shēng huà shì jì    容量:        100克
N-癸酰基-N-甲基葡糖胺    shēng huà shì jì    容量:        5克
N-苯甲酰-N-苯基羥胺    shēng huà shì jì    容量:        100克
N-苯甲酰-L-酪氨酰乙酯    shēng huà shì jì    容量:        100毫克
N-苯基代    shēng huà shì jì    容量:        100克
NTM培養(yǎng)基    shēng huà shì jì    容量:        500張/盒
N-R添加劑    shēng huà shì jì    容量:    RT,避光    25克
NHS活化瓊脂糖凝膠4FF    shēng huà shì jì    容量:        25毫克豚鼠白介素6(IL-6)免疫試劑盒    guinea pig Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit
豚鼠白介素5(IL-5)免疫試劑盒    Guinea pig interleukin 5,IL-5 ELISA Kit
豚鼠白介素4(IL-4)免疫試劑盒    Guinea pig interleukin 4,IL-4 ELISA Kit
豚鼠白介素22(IL-22)免疫試劑盒    Guinea pig Interleukin 22,IL-22 ELISA Kit
豚鼠白介素2(IL-2)免疫試劑盒    Guinea pig interleukin 2,IL-2 ELISA Kit
豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)免疫試劑盒    Guinea Pig Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA kit
豚鼠白介素1β(IL1B)免疫試劑盒    Guinea pig Interleukin-1 beta,IL1B ELISA kit
豚鼠白介素18(IL-18)免疫試劑盒    Guinea pig Interleukin 18,IL-18 ELISA Kit
豚鼠白介素17(IL-17)免疫試劑盒    Guinea pig Interleukin 17,IL-17 ELISA Kit

 

 


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