人胚肺成纖維細胞；MRC-5特性來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。
| 產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
| 人胚肺成纖維細胞；MRC-5特性 | 成纖維細胞樣 | 上海 | 3－5天 |
細胞名稱
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 MRC-5細胞系來自14周齡男性胎兒的正常肺組織，該細胞老化前能傳代42~46個倍增時間。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:2~1:5傳代；每周1~2次。
傳代情況 P20
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR Amelogenin：X，Y；CSF1PO：11，12；D13S317：11，14；D16S539：9，11；D18S51：15，21；D19S433：14，15；D21S11：31.2；D2S1338：20；D3S1358：15，17；D5S818：11，12；D7S820：10，11；D8S1179：13；FGA：21，23；TH01：8；TPOX：8；vWA：15；
同工酶
染色體 46，XY，部分細胞為亞二倍體
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
豬前列腺素G/H合酶2(PTGS2)免疫試劑盒 Pig prostaglandin G/H synthase 2,PTGS2 ELISA kit
豬前列腺素F2α(PGF2α)免疫試劑盒 Pig Prostaglandin F2α,PGF2α ELISA Kit
豬前列腺素E2(PGE2)免疫試劑盒 Pig Prostaglandin E2,PGE2 ELISA Kit
豬葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2(GLUT2)免疫試劑盒 Pig Glucose transporter 2,GLUT2 ELISA Kit
豬皮質(zhì)抑素/*穩(wěn)定蛋白(CORT)免疫試劑盒 Pig cortistatin,CORT ELISA kit
豬皮質(zhì)酮(CORT)免疫試劑盒 Porcine Corticosterone,CORT ELISA Kit
豬皮質(zhì)類固醇結(jié)合球蛋白(SERPINA6)免疫試劑盒 Pig Corticosteroid-binding globulin,SERPINA6 ELISA kit
豬*(Cortisol)免疫試劑盒 Porcine Cortisol ELISA Kit
豬*XIIIB鏈(F13B)免疫試劑盒 Pig Coagulation factor XIII B chain,F13B ELISA kit
豬*XIIIA鏈(F13A1)免疫試劑盒 Pig Coagulation factor XIII A chain,F13A1 ELISA kit
豬*X(F10)免疫試劑盒 Pig coagulation factor X,F10 ELISA kit
豬*ⅩⅢ(FⅩⅢ)免疫試劑盒 Pig coagulation factor ⅩⅢ,FⅩⅢ ELISA Kit
豬*Ⅶ(FⅦ)免疫試劑盒 Pig coagulation factor Ⅶ,FⅦ ELISA Kit
豬*Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒 Pig coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA Kit
豬*抗*復(fù)合物(TAT)免疫試劑盒 Pig thrombin-antithrombin complex,TAT ELISA Kit
豬腦鈉素(BNP)免疫試劑盒 Porcine brain natriuretic peptide,BNP ELISA Kit
豬鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運載體1(SGLT1)免疫試劑盒 Pig sodium-glucose cotransporter 1,SGLT1 ELISA Kit
豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)免疫試劑盒 Pig Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit
豬內(nèi)皮素1(ET-1)免疫試劑盒 Porcine endothelin 1,ET-1 ELISA Kit
豬末端補體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)免疫試劑盒 Pig terminal complement complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit
豬繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(AMH)免疫試劑盒 Pig anti-Mullerian hormone,AMH ELISA kit
豬免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒 Porcine Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit
豬免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒 Porcine Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit
ABCA2 英文名稱： 三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白2抗體 0.2ml
ApoB 英文名稱： 載脂蛋白B抗體 0.1ml
ALOX15B 英文名稱： 花生四烯酸15脂氧合酶2抗體 0.2ml
APOC4 英文名稱： 載脂蛋白C4抗體 0.2ml
ARH 英文名稱： 低密度脂蛋白受體銜接蛋白抗體 0.2ml
AUP1 英文名稱： 原始廣泛存在蛋白1抗體 0.2ml
ANKRD37 英文名稱： 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體 0.2ml
A4GALT 英文名稱： α1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶1 0.2ml
AGTRAP 英文名稱： 血管緊張素Ⅱ受體相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
AX2R 英文名稱： 膜粘連蛋白2受體抗體 0.2ml
ACEI 英文名稱： 血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體 0.1ml
AATF 英文名稱： 拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體 0.2ml
AACT-Alpha1 英文名稱： α-1抗胰*抗體 0.1ml
alpha 1 Antitrypsin 英文名稱： α-1抗*抗體 0.1ml
ABCB6 英文名稱： ATP結(jié)合蛋白家族6抗體 0.1ml
ABCG1 英文名稱： 三磷酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗體 0.1ml
Adiponectin receptor 2 英文名稱： 脂聯(lián)素受體2抗體 0.1ml
ANGEL1 英文名稱： ANGEL1蛋白抗體 0.2ml
ANGEL2 英文名稱： ANGEL2蛋白抗體 0.2ml
ANKLE2 英文名稱： ANKLE2蛋白抗體 0.2ml
ANKMY1 英文名稱： 特異性錨樣蛋白1抗體 0.2ml
ANKRD13B 英文名稱： 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13B抗體 0.2ml
ANKRD20A1 英文名稱： 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A1抗體 0.2ml
ANKRD20A3 英文名稱： 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A3抗體 0.2ml
ANKRD22 英文名稱： 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白22抗體 0.2ml
