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腦脊液樣本該如何收集與保存

閱讀:443發(fā)布時(shí)間:2015-11-27

如今,ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)樣本已不僅僅局限于血清、血漿組織了,更多時(shí)候廣大科研者開始提取腦脊液作為研究對(duì)象。那么,腦脊液該如何提取跟保存呢?如果您心中也帶著這個(gè)疑惑,請(qǐng)跟隨我司技術(shù)部劉老師的腳步一起獲知其中的奧秘。 腦脊液的采集  1.狗、兔腦脊液的采集通常采取脊髓穿刺法:動(dòng)物輕度麻醉后,側(cè)臥位固定,使頭部及尾部向腰部盡量彎曲,剪去第七腰椎周圍的被毛。消毒后操作者在動(dòng)物背部用左手姆、食指固定穿刺部位的皮膚,右手持腰穿刺針垂直刺入,當(dāng)有落空感及動(dòng)物的后肢跳動(dòng)時(shí),表明針已達(dá)椎管內(nèi)( 蛛網(wǎng)膜下腔),抽去針芯,即見腦脊液流出。如果無(wú)腦脊液流出,可能是沒有刺破蛛網(wǎng)膜。輕輕調(diào)節(jié)進(jìn)針?lè)较蚣敖嵌龋绻X脊液流的太快,插入針芯稍加阻塞,以免導(dǎo)致顱內(nèi)壓突然下降而形成腦疝。 ELISA試劑盒 2.大鼠腦脊液的采集可采用枕大孔直接穿刺法  在大鼠麻醉后,頭部固定于定向儀上。頭頸部剪毛、消毒,用*沿縱軸切一縱行切口(約2cm)用剪刀鈍性分離頸部背側(cè)肌肉。為避免出血,zui深層附著在骨上的肌肉用*背刮開,暴露出枕骨大孔。由枕骨大孔進(jìn)針直接抽取腦脊液。抽取完畢逢好外層肌肉、皮膚。刀口處可撒些磺胺藥粉,防止感染。采完腦脊液后,應(yīng)注入等量的消毒生理鹽水,以保持原來(lái)腦脊髓腔的壓力。  腦脊液的保存條件  ELISA試劑盒   1.如果實(shí)驗(yàn)要求只是測(cè)定其中的蛋白含量的話,采集腦脊液后,離心1500g(左右)/10min(左右)。然后收集上清,分裝保存于液氮或-80度即可。。整個(gè)過(guò)程是冰上操作。 2.保存過(guò)程中,避免反復(fù)凍溶,防止蛋白降解。


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