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DIY夾心法ELISA常見技術指南

閱讀:233發布時間:2015-5-13

DIY夾心法ELISA試劑盒常見技術指南:
1、選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對;若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對。
2、ELISA試劑盒實驗中為了確定*信號和zui低背景應將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預實驗中進行彼此相抗的滴定。同時,應包括在適當范圍內的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規提供的范圍進行操作。
3、標準品的配制:對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書,注意每批的細節。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據每批說明書中的細節,將凍干的細胞因子復溶。
4、一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml。可利用標準的ELISA試劑盒操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統可在一定范圍內提高靈敏度。
5、為了優化靈敏度,建議過夜孵育標準品和標本。
6、若使用過氧化物酶作為顯色系統,應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
7、當測定混合液體中的抗原時,如血清,建議在標本稀釋液中加不相干的Ig.Galectin 1    半乳糖凝集素1抗體
AIF1    離子鈣接頭蛋白抗體
IRX4    Iroquois同源蛋白4抗體
IFRD1    干擾素相關發育調節蛋白1抗體(神經生長因子誘導蛋白PC4)
ILP2    抑制細胞凋亡樣蛋白2抗體
IFITM1    干擾素誘導跨膜蛋白1抗體
IFI44    干擾素誘導蛋白44抗體
ITPR3    5-三磷酸肌醇受體3抗體
IFNW1    干擾素omega 1蛋白抗體
IFNA7    干擾素alpha 7蛋白抗體
IFN-Beta    干擾素β抗體
ID1    DNA結合抑制因子1抗體
IFI-202    γ干擾素誘導蛋白202抗體
intestinal FABP/IFABP/FABP2    腸型脂肪酸結合蛋白抗體
ING1    生長抑制因子基因1抗體
IL-8/CXCL8    白介素8抗體
ILK-1    整合素連接激酶-1抗體
phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180)    磷酸化KB抑制蛋白激酶α抗體
Phospho-IKK alpha(Ser180) + IKK beta(Ser181)    磷酸化KB抑制蛋白激酶α/β抗體
Phospho-IKK alpha/beta (Ser176 + Ser180)    磷酸化KB抑制蛋白激酶α/β抗體
IFT46    細胞纖毛內轉運同源蛋白46抗體


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