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閱讀:450發(fā)布時(shí)間:2017-5-16
關(guān)于瑞氏色素的使用你知道多少?
瑞氏色素是由堿性染料美藍(lán)( Methvlem blue )和酸性染料黃色伊紅( Eostm Y )合稱伊紅美藍(lán)染料,是一種復(fù)合中性染色劑,不溶于水但是可以溶于乙醇。對(duì)原生質(zhì)的染色作用有區(qū)別,具有嗜中性、嗜堿性和嗜酸性的作用。下面是瑞氏色素染色步驟的簡(jiǎn)要概括。
瑞氏染液的制備
(1) 瑞氏染液配制:
瑞氏染料 830gm或1g;
甲醇(AR) 500ml或600ml;
1.先稱干燥(事先放入溫箱干燥過夜)瑞氏染料放置乳缽內(nèi),用乳棒輕輕敲碎染料成粉末,再行研磨至聽不到研芝麻聲即呈細(xì)粉末,加少許甘油或甲醇溶解研磨,使染料在乳缸內(nèi)顯“一面鏡”光澤,而無染料粉粒沉著。
2.再加較多量甲醇研磨呈一面鏡光亮,靜置片刻,將上層液體倒入一清潔儲(chǔ)存瓶?jī)?nèi)(用甲醇空瓶),再加甲醇研磨,重復(fù)數(shù)次,至乳缽內(nèi)染料及甲醇用完為止,搖勻,密封瓶口。
3.存室溫暗處,儲(chǔ)存愈久,則染料溶解、分解就越好,一般儲(chǔ)存3個(gè)月以上為佳。
(2) 緩沖液:
緩沖液作用:
1.染色對(duì)氫離子濃度是十分敏感的,據(jù)觀察pH值的改變,可使蛋白質(zhì)與染料形成的化合物重新離解。
2.緩沖液須保持一定的pH使染色穩(wěn)定,PBS的pH 一般在6.4~6.8,
3.偏堿性染料可與緩沖液中酸基起中和作用,偏酸性染料則與緩沖液中的堿基起中和作用,使pH恒定。
瑞氏色素染色步驟:
1、 取病料涂片、自然干燥
2、 滴加瑞氏染液染3分鐘,使標(biāo)本被其中甲醛所固定;
3、 加等量PH6.4的磷酸鹽緩沖液(或等量超純水)輕輕晃動(dòng)玻片,均勻靜置5分鐘;
4、 水洗、吸干、鏡檢。
瑞氏色素染色結(jié)果:
1. 紅細(xì)胞呈淺紅色,*稍淡而略有蝶形態(tài)
2. 白細(xì)胞系統(tǒng)清晰易分,細(xì)胞膜清晰呈紫黑色,細(xì)胞核著色呈深淺不同的紫紅色,胞漿淺紅色。胞漿中各種顆粒區(qū)分明顯。其中中性粒細(xì)胞胞漿中顆粒呈淡紫紅色、嗜酸粒細(xì)胞胞漿中顆粒呈桔紅色、嗜堿性粒細(xì)胞胞漿中顆粒呈藍(lán)褐色;單核細(xì)胞的胞漿呈灰藍(lán)色,胞漿中顆粒呈細(xì)小淡紫紅色或藍(lán)紫色;淋巴細(xì)胞胞漿呈淡藍(lán)色。
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