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用ELISA檢測樣品中的目的蛋白含量,包括實驗設(shè)計

閱讀:965發(fā)布時間:2017-5-2

用ELISA檢測樣品中的目的蛋白含量,包括實驗設(shè)計

1.混合蛋白樣品肯定不能用于包被。包被的蛋白質(zhì)要求純度非常高,而且是越高越好,混合蛋白不可能實現(xiàn)包被,即便是你包被成功,檢測結(jié)果也說明不了任何問題,因為你無法證明蛋白質(zhì)間的交叉反應(yīng)對你的實驗影響。
2.在有純品的條件下,肯定該選針對磷酸化的酶的單抗,此時測定的結(jié)果才能真正代表蝦在此時期的酶的活性。而另一種抗體不能說明這個問題,因為不同時期,磷酸化和非磷酸化的酶的比例可能給是不一樣的。
3.目前的條件下,western肯定要做。它可以將兩種酶分開,但要選好膠的濃度,保證兩種酶能分開。即便是有純品的情況下,也要盡量作western,它的結(jié)果可以和elisa互相印證,且western的結(jié)果比elisa更直觀,更有說服力。

 


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