一、原理：氨基酸是兩性電解質，不能直接通過酸堿滴定來計算其含量。但在常溫下，甲醛能迅速與氨基酸的氨基結合，生成羥甲基化合物，使上述平衡右移，促使-NH3釋放H+，使溶液的酸度增加，滴定終點移至酚酞的變色域內(PH9.0左右)。因此，可用酚酞做指示劑，用標準堿進行滴定。

二、材料與試劑

25ml錐形瓶、3ml微量滴定管、吸管

0.1M標準甘氨酸溶液：準確稱取750ml甘氨酸，溶解后定容至100ml

0.1M氫氧化鈉、酚酞指示劑(0.5%酚酞的50%乙醇溶液)、中性甲醛溶液(在50ml36%-37%分析純甲醛溶液中加入1ml0.1%酚酞乙醇水溶液，用0.1M的氫氧化鈉溶液滴定到微紅，儲于密封的玻璃瓶中。此試劑在臨用前配制。如已放置一段時間，則使用前需重新中和。

三、操作方法

1、取3個25ml的錐形瓶，編號。向第1、2號瓶內各加入2ml0.1M的標準甘氨酸溶液和5ml水混勻。向3號瓶內加7ml水。然后向3個瓶中各加5滴酚酞指示劑，混勻后各加2ml甲醛溶液，再混勻，分別用0.1M標準氫氧化鈉溶液滴定至溶液顯微紅色。

重復以上實驗2次，記錄每次每瓶消耗標準氫氧化鈉溶液的毫升數。取平均值，計算甘氨酸氨基氮的回收率。甘氨酸氨基氮回收率=實際測得值/加入理論量×100

公式中實際測得量為滴定*和二號瓶耗用的標準氫氧化鈉溶液的ml數的平均值與三號瓶耗用的標準氫氧化鈉溶液的ml之差乘以標準氫氧化鈉的摩爾濃度，再乘以14.008。

2ml乘以標準甘氨酸的摩爾濃度再乘以14.008。即為加入理論量的mg數。

2、取未知濃度的甘氨酸溶液2ml，依上述方法進行測定，平行做幾份，取平均值。計算每ml甘氨酸溶液中含有氨基氮的mg數。

氨基氮(mg/ml)=(V末-V對)×M氫氧化鈉×14.008/2

式中：V末為滴定待測液耗用標準氫氧化鈉溶液的平均值

V對為滴定對照液(3號瓶)耗用標準氫氧化鈉溶液的平均值