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組織內(nèi)蛋白的糖基化位點(diǎn)檢測(cè)新方法

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N-連接的糖基化是一種具有重要生物學(xué)意義的翻譯后修飾過程,但是現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的糖基化蛋白并不多。作者在這里采取了一種“濾紙收集樣品(filter aided sample preparation,FASP)"的方法,籍此糖基化多肽可以富集于載有凝集素的濾紙上,然后用高度的質(zhì)譜技術(shù)從小鼠的四種組織和血漿的2352種蛋白質(zhì)上發(fā)現(xiàn)6367個(gè)糖基化位點(diǎn)。其中,涵蓋了Swiss-port服務(wù)器中已經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證的830個(gè)糖基化位點(diǎn)中的74%,而另外5753個(gè)糖基化位點(diǎn)則是*次被發(fā)現(xiàn)。 這些位點(diǎn)都帶有" N-!P-[S|T]-!P (!P 不是脯氨酸)“這樣的特征,也有些少見的 N-X-C基序或非保守序列。綜合FASP及亞細(xì)胞糖基化位點(diǎn)定位分析揭示,這些糖基化位點(diǎn)一般都朝向胞外區(qū)或朝向ER腔、高爾基體、溶酶體或者過氧化物酶體。那些與發(fā)育、器官特定功能或者疾病相關(guān)的蛋白上有過多的糖基化修飾位點(diǎn)。

該研究的發(fā)現(xiàn),是蛋白質(zhì)組學(xué)中的一個(gè)重大進(jìn)展,因?yàn)檠芯拷Y(jié)果有助于人們理解人體內(nèi)的生理生化過程。此外,對(duì)于了解疾病發(fā)生機(jī)制也有重要作用。科學(xué)家們一直在尋找細(xì)胞的蛋白質(zhì)上哪些位點(diǎn)的修飾與疾病發(fā)生相關(guān),例如哪些蛋白的糖基化與Alzheimer病相關(guān),因此前的研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)Alzheimer的發(fā)展過程中,N-糖基化是個(gè)很重要的因素,科學(xué)家們懷疑蛋白質(zhì)的糖基化甚至與Alzheimer的轉(zhuǎn)歸相關(guān)。因此,本研究的結(jié)果,將深化對(duì)這些疾病發(fā)病機(jī)理的認(rèn)識(shí)和探索。 

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