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約翰斯霍普金斯大學的科學家們使用一種他們研發的方法,在將人體中一種細胞移動到位點時,能夠不時的進行觀察。這種方法可以了解一種蛋白質為何和如何在一個位置能進行信號傳遞和表達增加,而同樣的蛋白質在另一地點則死亡。
他們的研究發表在2月14日《Nature Methods》上,用一種化學工具將細胞內的蛋白質移動到外周一個稱為質膜的地方。
“如果一個特定的蛋白被激活,激活細胞的時間影響了細胞對外界刺激的反應,"Takanari Inoue博士,約翰斯霍普金斯大學醫學院細胞生物學助理教授說,“我們這個新工具的目標是在細胞的許多地方快速的對蛋白質的活化進行操作。"
細胞巧妙地解決了應對外部刺激的困境,比如溫度,盡管它們使用了有限的分子。這一觀念是說一個單一蛋白通過改變其位置和速度以及激活時間來發揮多重作用。
“細胞內的化學信號通過復雜的反饋回路和交互作用來蛋白質分子,"Inoue說,“所以想準確了解每個蛋白質的位置對信號的影響,需要能夠快速移動相關蛋白質到細胞特定的細胞器中。這些措施包括線粒體(細胞的發電機)和高爾基體(細胞的運載系統)。"
霍普金斯研究團隊選擇了Ras信號蛋白作為研究對象,它通過細胞傳遞信號。它是參與腫瘤細胞生長的調節子。Ras已經被長期研究,它是已知的一種分子開關。然而,沒有人能識別Ras在高爾基體和線粒體中的不同位置,更不用說Ras在這些地方和其他細胞器中同時激活時會發生什么事情。
將人Hela 細胞和Ras在顯微鏡下進行觀察,研究小組使用一種特殊的二聚體探針,這是一個特異性的小分子,能同時結合彼此無親和力的蛋白,并將它們綁定在一起。在這個系統中,一種蛋白錨定在一個細胞器里,另一種是在細胞內自由浮動。添加一個化學二聚體誘導自由蛋白和錨定蛋白結合在一起。
使用剪切酶,研究小組剪切了配對蛋白質的DNA,以改變其目標分子的位點。他們切斷了“郵寄地址" ,其作為一個已知的目標序列 ,即原來運送到質膜的蛋白質,用新的地址取代它(目標序列),由它來將蛋白運輸到特定的細胞器。
“我們能夠在原位操縱蛋白質的活動,并可以在每個細胞器上快速進行,"Inou說,“zui終,這將有助于我們更好地理解這些關鍵的細胞成分的功能。"
本研究由美國國家衛生研究院資助。
除了以上以外,本文另外的作者有Toru Komatsu, Igor Kukelyansky, J. Michael McCaffery, Tasuku Ueno and Lidenys C. Varela,所有研究者都來自約翰斯霍普金斯大學。
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